【摘 要】
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丙烯醛是一种高活性的α-β不饱和醛,这种液体无色、易燃、挥发性强,以刺鼻的气味和对粘膜,特别是眼睛和上呼吸道的强烈刺激而闻名。食品热加工是大气中丙烯醛的一个重要来源,在食品的热加工过程中,丙烯醛通过多种途径产生,广泛分布于油炸烘焙食品、过热的植物油、酒精饮料以及富含脂类和碳水化合物的食品。丙烯醛具有神经毒性、遗传毒性和潜在的致癌性,因此,寻找能够减少或拮抗食品中丙烯醛的毒性作用的活性物质,对保护人
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丙烯醛是一种高活性的α-β不饱和醛,这种液体无色、易燃、挥发性强,以刺鼻的气味和对粘膜,特别是眼睛和上呼吸道的强烈刺激而闻名。食品热加工是大气中丙烯醛的一个重要来源,在食品的热加工过程中,丙烯醛通过多种途径产生,广泛分布于油炸烘焙食品、过热的植物油、酒精饮料以及富含脂类和碳水化合物的食品。丙烯醛具有神经毒性、遗传毒性和潜在的致癌性,因此,寻找能够减少或拮抗食品中丙烯醛的毒性作用的活性物质,对保护人类免受其危害具有重要意义。几千年来,黑灵芝（Ganoderma atrum,G.atrum）一直被誉为高营养价值的药物或饮食。黒灵芝多糖（PSG-1）表现出广泛的有益健康的作用,包括免疫调节、化疗保护、抗氧化和降血糖等。特别是,最新的研究证明,PSG-1可以通过上皮细胞调节粘膜免疫力。然而,关于丙烯醛对肠道诱导的影响的信息很少。因此,本研究建立了丙烯醛诱导的IEC-6细胞损伤模型,然后通过全转录组测序全面筛选PSG-1和丙烯醛处理或未处理的IEC-6转录本。主要结论归纳如下:1、丙烯醛作用于IEC-6细胞可以降低细胞活力,破坏细胞内氧化平衡,降低SOD活性和GPx活性,增加MDA含量,降低Occludin、Claudin和Zonula occludens（ZO-1）蛋白水平;可以提高自噬关键蛋白LC3和Beclin 1蛋白水平,降低p-m TOR和p-akt表达水平,从而激活自噬下游通路;能够降低MMP,降低Bcl-2蛋白表达量,提高凋亡关键蛋白Caspase-3和Caspase-9表达水平,从而诱导细胞凋亡。2、PSG-1可以恢复丙烯醛诱导的的氧化损伤,提高IEC-6细胞的抗氧化能力,增强了丙烯醛降低的Occludin、Claudin和ZO-1的表达,维持肠道粘膜的完整性。PSG-1处理能够降低自噬关键蛋白过表达,减缓丙烯醛诱导的过度自噬。PSG-1处理细胞后可以提高MMP,提高Bcl-2蛋白表达量,降低凋亡关键蛋白Caspase-3和Caspase-9表达水平,阻止内源性途径的凋亡从而保护细胞。3、自噬抑制剂和凋亡抑制剂作用于IEC-6细胞后,紧密连接蛋白的表达量增加;在自噬抑制剂处理IEC-6细胞后,自噬蛋白LC3的表达减少,同时自噬抑制剂抑制了Bcl-2、Caspase-3和Caspase-9的表达;在凋亡抑制剂处理的IEC-6细胞中,Caspase-3蛋白的表达减少,而且凋亡抑制剂抑制了关键的自噬蛋白Beclin 1的表达。4、通过全转录组测序,得到的m RNA数据,结果显示,与对照组相比,丙烯醛组共筛选出238个DEGs,其中上调基因142个,下调96个;PSG-1组共筛选出512个DEGs,其中上调基因262个,下调250个;与丙烯醛组相比,PSG-1组共筛选出327个DEGs,其中上调基因195个,下调132个。对于所得DEGs进行GO和KEGG富集分析,富集显著的功能集有氧化还原酶活性、调节细胞因子的产生、对细胞外刺激的反应。KEGG富集分析鉴定出细胞因子-细胞因子受体的相互作用、谷胱甘肽的代谢等通路。
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