该课题从寻找多糖受体入手研究黄芪多糖(APS)和灵芝多糖(GLPS)免疫调节作用的分子机制.我们证明APS和GLPS可在体外促进BALB/c小鼠B细胞而非T细胞增殖.两者均可促进体外培养的小鼠B细胞产生和分泌免疫球蛋白,不能促进T细胞表达IL-2mRNA.另外,两种多糖均能增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能和细胞因子的分泌.为了能比较直观地确认多糖作用的靶细胞以及其识别受体,我们利用化学合成方法制备了荧光胺标记的APS(fl-APS),作为荧光探针,利用流式细胞术检测能够与APS直接结合的免疫细胞类型.结果发现APS可以直接结合BALB/c小鼠原代B细胞和巨噬细胞,不能结合T细胞.并可结合人单核细胞来源的肿瘤细胞系THP-1,而对B淋巴瘤来源的Raji或T淋巴瘤来源的CCRF肿瘤细胞系不能结合,这一现象通过激光共聚焦图象分析得到了进一步证实.另外,抗小鼠Ig抗体能够抑制APS所诱导的小鼠脾细胞增殖以及fl-APS与小鼠脾细胞在体外的直接结合.在GLPS作用下,C3H/HeJ小鼠脾细胞的增殖程度远远低于BALB/c小鼠脾细胞.抗小鼠Ig抗体可显著抑制GLPS所诱导的BALB/c小鼠脾细胞增殖.总之,我们的结果证明APS和GLPS特异性作用于巨噬细胞和B细胞,不能直接作用于T细胞.APS通过B细胞mIg活化B细胞,通过TLR4活化巨噬细胞.GLPS通过B细胞mIg及TLR4活化B细胞,通过TLR4活化巨噬细胞.另外血清和细胞中还存在与GLPS直接结合的蛋白分子.这些结果对更好的理解中药多糖免疫调节作用的细胞和分子机制具有重要意义.