猪链球菌(Streptococcus suis)可引起猪败血症、脑膜炎、心内膜炎和关节炎,也是一种重要的人畜共患病病原,具有重要的公共生学意义。因此,开展猪链球菌病病原学调查与监测,对于该病的防治具有重要的理论和实践意义。本论文研究工作涉及河北省不同地区猪链球菌的血清型监测与分析,致病性猪链球菌的耐药性和毒力基因分析,利用优势致病菌株研制猪链球菌病价灭活疫苗,旨在了解河北省猪链球菌病的流行情况,为猪链球菌病的防治提供科学依据。从河北省石家庄、邢台、张家口、沧州、唐山、秦皇岛等地采集临床健康猪鼻拭子600份,经增菌分离培养、革兰染色镜检、PCR鉴定猪链球菌种及分离菌株血清型鉴定。结果表明,从600份鼻拭子样品中共检出148株猪链球菌,检出率为24.67%,其中27株为猪链球菌7型,24株为猪链球菌2型,20株为猪链球菌9型,2株为猪链球菌1型,75株未定血清型。由此表明,河北省正常猪群中猪携带的猪链球菌血清型呈现复杂多样的特点。对2005-2012年从河北省各地区临床病死猪分离获得的96株猪源链球菌进行了生物学特性鉴定及血清分群。结果表明,分离的链球菌以兰氏D群为主,占34.4%,其次为C群(18.8%)。利用PCR扩增猪链球菌的种特异性gdh基因以及荚膜多糖cpslI、cps2J、cps7H和cps9H基因,对96株链球菌分离株进行猪链球菌种的鉴定和分型。结果显示,属于猪链球菌的为47株,其中猪链球菌2型(SS2)为65.96%(31/47),SS7为2.13%(1/47),SS9为4.25%(2/47),其它血清型为27.66%(13/47)。采用微量稀释法测定了96株猪源链球菌对27种药物的体外最小抑菌浓度(MIC)。结果显示,94.8%的菌株呈现多重耐药,耐药谱型达14种；对磺胺类药物、氨基糖苷类药物、四环素类药物、林可胺类药物、大环内酯类药物的耐药性最为严重,对青霉素类、头孢菌素类、喹诺酮类、酰胺醇类耐药性次之；对头孢菌素类药物——头孢噻呋、头孢唑啉、头孢噻吩的敏感率分别为87.5%、85.4%和83.3%。由此表明,猪链球菌临床分离株对常用药物均产生了一定的耐药性。应用PCR对血清型明确的34株猪链球菌的6个毒力因子(gdh、cps、ef、sly和orf2)进行了检测。结果显示,31株猪链球菌2型分离株表现为9种毒力因子基因型,以cps2+/gdh+/sly+/ef+/mrp+/orf2+和cps2+/gdh+/sly-/ef+/mrp+/orf2+为主,分别占32.3%和35.5%,提示河北省SS2的主要流行菌株为同时具有6种毒力因子的高致病性菌株和sly基因缺失株；1株SS7的基因型为cps7+/gdh+/sly+/ef-/mrp+/orf2+;2株SS9的基因型分别为cps9+/gdh+/sly+/ef-/mrp+/orf2+和cps9+/gdh+/sly-/ef-/mrp+/orf2+。致病性试验结果发现,具有cps2+/gdh+/sly+/ef+/mrp+/orf2+和cps2+/gdh+/sly-/ef+/mrp+/orf2+基因型的菌株,对猪均具有较强的致病性和致死性,死亡率达100%。利用毒力强、分别属于C、D两个主要流行血清群的的菌株LN-2和BBD-1,研制出猪链球菌病氢氧化铝二价灭活疫苗。免疫攻毒试验结果表明,疫苗对断奶仔猪、育肥猪均具有较好的安全性,用LN-2和BBD-1菌株攻毒,免疫组可获得完全保护。