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莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是单细胞真核生物,它生长周期短,繁殖快,结构简单,遗传背景清晰,拥有植物的基本特征,是植物界最原始的物种之一。而且莱茵衣藻中参与脂质代谢的基因数量较少,使它成为研究脂质代谢的模式生物。目前关于莱茵衣藻的脂质组学和NaCl对其生长发育的影响等方面已有较多研究,但未见细胞壁缺失对其生长代谢(包括脂质代谢)影响等方面的报道。本论文以野生型和细胞壁缺失型莱茵衣藻为研究对象,重点研究了(1)不同浓度的NaCl胁迫下,细胞壁缺失后莱茵衣藻的生长发育及一些生理生化指标的变化;(2)脂质组学研究技术与手段,探索了细胞壁缺失对莱茵衣藻的全脂质组种类和含量的影响。本文主要试验结果如下:
1、缺失细胞壁后莱茵衣藻细胞体积变小,重量减轻,但对其生长发育及光合活性没有显著影响。缺失细胞壁使衣藻细胞内的丙二醛含量增加,表明其膜脂过氧化程度增加。在受到100mMNaCl胁迫后,莱茵衣藻细胞的生长受到阻碍,随着NaCl浓度的升高,其生长速率进一步降低,且细胞数量也明显下降,同时细胞内的叶绿素含量也明显下降。但经试验表明,随NaCl浓度的升高,衣藻细胞内的叶绿素含量呈先升后降的趋势。
2、利用脂质组学分析手段,我们对野生型莱茵衣藻和细胞壁缺失型莱茵衣藻细胞内的全脂质组信息分析,鉴定出84种差异脂质化合物,可分为15类,分别是DAG、TAG、DGDG、MGDG,甾醇类Sito-、Stigma-、Camp/Brassica-,甘油磷脂类PA、PE、PI、PG,鞘脂类PhytoCer、S1P、GIPC、GluCer。其中含量增加的有48种,含量减少的有36种。我们发现含量变化显著的脂类化合物主要集中在膜脂中的鞘脂类和甾醇酯类,鞘脂类在细胞壁缺失型莱茵衣藻细胞内的含量均呈现减少的趋势,而检测到的11种甾醇酯类,其中有10种在细胞壁缺失型莱茵衣藻细胞内的含量均增加。初步证实了在缺失细胞壁后,细胞膜成分发生改变,以维持细胞的正常生命活动。
本论文证明细胞壁在藻类植物抵抗盐胁迫方面具有重要作用,同时也为建立植物细胞壁与其脂质代谢的关联性提供理论基础。
1、缺失细胞壁后莱茵衣藻细胞体积变小,重量减轻,但对其生长发育及光合活性没有显著影响。缺失细胞壁使衣藻细胞内的丙二醛含量增加,表明其膜脂过氧化程度增加。在受到100mMNaCl胁迫后,莱茵衣藻细胞的生长受到阻碍,随着NaCl浓度的升高,其生长速率进一步降低,且细胞数量也明显下降,同时细胞内的叶绿素含量也明显下降。但经试验表明,随NaCl浓度的升高,衣藻细胞内的叶绿素含量呈先升后降的趋势。
2、利用脂质组学分析手段,我们对野生型莱茵衣藻和细胞壁缺失型莱茵衣藻细胞内的全脂质组信息分析,鉴定出84种差异脂质化合物,可分为15类,分别是DAG、TAG、DGDG、MGDG,甾醇类Sito-、Stigma-、Camp/Brassica-,甘油磷脂类PA、PE、PI、PG,鞘脂类PhytoCer、S1P、GIPC、GluCer。其中含量增加的有48种,含量减少的有36种。我们发现含量变化显著的脂类化合物主要集中在膜脂中的鞘脂类和甾醇酯类,鞘脂类在细胞壁缺失型莱茵衣藻细胞内的含量均呈现减少的趋势,而检测到的11种甾醇酯类,其中有10种在细胞壁缺失型莱茵衣藻细胞内的含量均增加。初步证实了在缺失细胞壁后,细胞膜成分发生改变,以维持细胞的正常生命活动。
本论文证明细胞壁在藻类植物抵抗盐胁迫方面具有重要作用,同时也为建立植物细胞壁与其脂质代谢的关联性提供理论基础。