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pH-区带逆流色谱技术是基于普通逆流色谱技术发展起来的。该技术依据物质的解离常数pKa值和疏水性的不同来实现分离。它具有上样量大,分离所得物质纯度高等特点,现主要应用于生物碱、有机酸、染料、氨基酸衍生物及对映异构体等物质的分离。本论文主要采用pH-区带逆流色谱技术对天然产物中酚酸类物质及入侵植物有效成分进行分离分析。本论文通过以标准品咖啡酸和绿原酸为样品建立了pH-区带逆流色谱分离方法,再将该方法成功应用于入侵植物黄顶菊和天然产物金银花中绿原酸的分离。1.咖啡酸和绿原酸标准品的pH-区带逆流色谱分离方法。通过使用GS-20A型分析型逆流色谱,溶剂体系为甲基叔丁基醚-乙腈-水4：1：5(v/v),上相为固定相,保留酸三氟乙酸(TFA)浓度为8mM；下相为流动相,洗脱碱氨水浓度为10mM,成功将咖啡酸与绿原酸分开。2.使用pH-区带逆流色谱成功分离天然产物中的绿原酸,并富集痕量的咖啡酸。使用GS-10A型半制备逆流色谱,溶剂体系为甲基叔丁基醚-乙腈-正丁醇-水4：1：1：5(v/v)；上相为固定相,保留酸TFA浓度为3mM：下相为流动相,洗脱碱氨水浓度为3mM,一次可以从1.4g的黄顶菊粗提物中分离得到16.2mg的绿原酸,纯度为92%。采用相同实验条件,成功从1.3g金银花粗提物中分离得到134.0mg绿原酸,纯度达99%以上。实验结果充分证明通过标准品所建立的方法对分离天然产物中绿原酸的可行性。针对入侵植物薇甘菊的研究：1.确定薇甘菊中有效成分的粗提工艺。采用石油醚、乙酸乙酯、80%乙醇逐级提取,料液比1：15,回流1.5h,回流一次。将80%乙醇提取物蒸干后,用溶剂体系：甲基叔丁基醚-乙腈-水2：2：3(v/v)的下相溶解,再用等体积的上相进行萃取,萃取三次后合并萃取溶液,蒸干。2.使用pH-区带逆流色谱分离薇甘菊粗提物中有效成分。溶剂体系：甲基叔丁基醚-乙腈-水2：2：3(v/v)；上相为固定相,保留酸TFA浓度为3mM;下相为流动相,洗脱碱氨水浓度为3mM。可一次从薇甘菊粗提物中分离得到三种纯度较高的物质。