一株天鹅源小鹅瘟病毒的全基因序列分析及小鹅瘟病毒标准抗原抗体物质的制备

来源 :扬州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:x111678
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
1.一株天鹅源小鹅瘟病毒的全基因序列分析本研究利用鹅胚从江苏某动物园送检的病死天鹅病料中分离到一株小鹅瘟病毒,命名为GPV-XZ20150328,对该株病毒进行了全基因克隆测序,拼接后获得了GPV-XZ20150328的全基因序列。将其与GenBank上已发表的GPV全基因序列和本实验室分离的另一株天鹅源GPV全基因序列进行比较,结果显示:GPV-XZ20150328株全长为5106bp,与欧洲标准B株基因序列全长相同,同源性为97.7%,与天鹅源GPV-SHFX (5050bp)株的同源性达99.8%,但在末端重复序列其出现56个基因的插入,提示,GPV在不同个体和区域可能存在一定差异。2.小鹅瘟病毒标准抗原物质的制备本研究通过鹅胚接种扩增小鹅瘟病毒,用超速离心法进行纯化,通过SDS-PAGE分析、直接透射电镜观察、血凝试验、PCR特异性分析及灭活条件测定后,用聚乙二醇6000(PEG6000)浓缩法制得GPV浓缩抗原。结果表明,扩增的病毒纯度较高且无AIV、NDV、 EDS76、MDPV、ALV、MDV、IBV、ILTV、IBDV、REV、DEV、TMUV等病毒的污染。灭活条件以0.3%β-丙内酯作用48h最佳。制得的GPV浓缩抗原与特异性抗体反应的琼扩效价为1.4。将制备的浓缩抗原加入1%BSA冻存保护剂,分装,冻干后经物理性状检查、计算CV值、无菌检验、支原体检验、均一性、稳定性、保质期等检验后获得了高质量的标准抗原,可以用于相应检测试剂的质量判别。3.小鹅瘟病毒标准抗体物质的制备本研究采用口服和注射的途径对雏鹅进行四次免疫后制备了抗小鹅瘟多抗血清。利用本实验室保存的一株抗鹅细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株(GPV-Mab-6C8)经Bab/c小鼠制备出抗小鹅瘟单克隆抗体。用琼脂扩散试验检测,该多抗血清的AGP效价为1:64,用GPV细胞适应毒建立的免疫荧光检测方法(IFA)检测该血清,IFA效价为1:6400,单抗的IFA效价为1:1600。特异性鉴定结果表明制备的抗体物质只与GPV反应,而不与NDV、 AIV、EDS76、ALV、REV、IBV、IBDV、TMUV等病毒反应,证明特异性良好。将制备的抗体物质加入0.01%硫柳汞,分装,冻干后经物理性状检查、无菌检验、支原体检验、均一性、稳定性、保质期等检验后获得了高质量的标准抗体。
其他文献
《普通高中生物学课程标准(2017年版)》也指出,生物学课程是以提高学生生物学科核心素养为宗旨的学科课程,是树立社会主义核心价值观、落实立德树人根本任务的重要载体。因此
时老汉在生气,看见他的人都绕道而行,以免被火灼伤。
拙作《“我们都是自由的鸟儿”——普希金和他的达吉雅娜》(载《阅读与写作》1999年第10期)曾指出,普希金《叶甫盖尼·奥涅金》的女主人公达吉雅娜深深地烙着诗人生活的
期刊
纵观中国文学发展的历史,可以发现一个有趣的现象:文学是在俗—→雅—→俗—→雅这样的螺旋型的轨迹中发展起来的。虽然自古至今雅俗之争辩始终不断,但每一次论辩后,都使文学
期刊
该研究探讨了孕早期苯并芘[Benzo(a)pyrene,B(a)P]暴露对卵巢雌激素和孕激素的影响及其可能的机制。将SPF级健康成年雌雄昆明小鼠交配合笼,次晨查得阴栓则记为孕第1天(D1)。
在高中英语教学中读和写占主导地位,两者有效结合可以促进高中生在英语课堂中综合发展,所以对于教师来说要将高中英语阅读重点放在读与写上面.文章主要是对高中英语阅读教学
我国古代伟大的教育家孔子说过“德之不修,学之不讲,闻义不能徙,不善不能改,是我忧也。”孟子也说过“存其心,养其性,所以事天下。夭寿不二,修身以俟之。”“君子之首,修其身而平天下
保教并重促进幼儿和谐发展李翠贞《幼儿教育工作规程》中指出:幼儿园的任务是“实行保育教育相结合的原则,对幼儿实施体、智、德、美全面发展的教育,促进其身心和谐发展”。因此
回 回 产卜爹仇贱回——回 日E回。”。回祖 一回“。回干 肉果幻中 N_。NH lP7-ewwe--一”$ MN。W;- __._——————》 砧叫]们羽 制作:陈恬’#陈川个美食 Back to yield
期刊
本文回顾了商周以来历史上西部地区民族关系的发展演变以及西部地区边疆治理的发展历程,分析了西部地区民族关系与边疆治理之间的关系。认为边疆治理始终与民族关系紧密相连,