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美洲斑潜蝇Liriomyza sativae是斑潜蝇属中三大主要害虫之一,被世界上许多国家和地区列为检疫性害虫加以控制。本文对美洲斑潜蝇不同地理种群和不同寄主种群的rDNA-ITS和β-tubulin基因进行了克隆和测序,应用不同的生物信息分析软件(DNAStar(Lasergene 501)和Clustal X1.8 & Mega2.1)分析了美洲斑潜蝇种群之间的遗传分化和亲缘关系。 1、通过软件DNAStar(Lasergene 501)和Clustal X1.8 & Mega2.1对美洲斑潜蝇不同寄主种群rDNA-ITS1、rDNA-ITS2、rDNA-ITS全序列进行分析,结果表明,扬州地区的美洲斑潜蝇已存在寄主种群分化,可分为三大类:嗜好寄主豆科(豇豆)、茄科(番茄)和葫芦科(黄瓜)上的种群为一类,它们之间的遗传分化不明显,遗传相似性和遗传距离分别为99.5~100%(DNAStar软件分析结果)和0.000~0.003(Mega2.1软件分析结果);非嗜好寄主锦葵科(棉花)上的种群为一类,与嗜好寄主种群的遗传相似性和遗传距离分别为15.8~51.1%和0.697~1.140;取食十字花科(青菜)的美洲斑潜蝇种群介于上述两类群之间。在此三类寄主种群中,取食十字花科的种群与嗜好寄主种群和非嗜好寄主种群之间的遗传相似性分别为79.0~98.3%和16.3~50.6%,遗传距离分别为0.007~0.045和0.727~1.181;说明取食十字花科的种群与嗜好寄主种群之间的亲缘关系近于其与非嗜好寄主种群之间的亲缘关系。 通过相同软件对5.8S rDNA进行序列分析,发现5.8S rDNA序列变异不大,但其分析结果与上述分析的结果相似。嗜好寄主种群之间遗传相似性和遗传距离分别为99.2%和0.000;非嗜好寄主种群与嗜好寄主种群遗传相似性和遗传距离分别为86.3~92.2%和0.068;取食十字花科的美洲斑潜蝇种群与嗜好寄主种群和非嗜好寄主种群之间的遗传相似性分别为96.2~98.3%和90.2%,遗传距离分别为0.022和0.092。 2、通过相同软件对美洲斑潜蝇不同地理种群rDNA-ITS1、rDNA-ITS2、rDNA-ITS全序列和5.8S rDNA进行序列分析可见,美洲斑潜蝇在我国也存在一定的地理分化。根据我们对6个省(区)美洲斑潜蝇种群的研究结果来看,主要分为三大类:广东(广州)、广西(南宁)和贵州(铜仁)的美洲斑潜蝇为第一类,它们之间的遗传分化不明显,遗传相似性和遗传距离分别为96.0~100%和0.000~0.007;江苏(扬州)和浙江(杭州)的美洲斑潜蝇种群为另一类,它们之间的遗传分化也不明显,遗传相似性和遗传陆亚娟:美洲斑潜蝇的种群分化研究距离分别为93 .9一100%和0.00任、0.036;海南(檐县)的美洲斑潜蝇种群为第三类。在此三大类地理种群中,海南(澹县)美洲斑潜蝇种群与江苏(扬州)和浙江(杭州)的美洲斑潜蝇种群的遗传相似性和遗传距离分别为67.小100%和0. 000刁.391,与广东 〔广州)、广西(南宁)和贵州(铜仁)的美洲斑潜蝇种群遗传相似性和遗传距离分别为2b.2一52.3%和0.478一1 .233;由此可见,该地区的种群与江苏(扬州)和浙江(杭州)的种群亲缘关系近于与其它地理种群之间的亲缘关系。 3、通过相同软件对不同寄主和不同地区美洲斑潜蝇的旦.加bulin基因序列进行比较分析发现,该基因序列变异不明显,亲缘关系均大于98%。在寄主种群中,寄主为豆科(更豆)、茄科(番茄)、葫芦科(黄瓜)和十字花科(青菜)的美洲斑潜蝇种群之间的遗传相似性和遗传距离分别为99 .0-99.5%和0.005司.011,寄主为锦葵科(棉花)的美洲斑潜蝇种群与其它寄主种群之间的遗传相似性和遗传距离分别为98.小99.0%和0.011一0.016;在地理种群中,海南(澹县)的美洲斑潜蝇种群与江苏(扬州)和浙江 (杭州)的美洲斑潜蝇种群的遗传相似性和遗传距离分别为99.0~9 9 .5%和0.005,它与广东(广州)、贵州(铜仁)和广西(南宁)的美洲斑潜蝇种群的遗传相似性和遗传距离分别为98.4-99.0%和0.011司.016。 从以上p .tubulin基因序列的分析结果可以看出,与rDNA一ITS序列相比,该基因的保守性较好,不适合于美洲斑潜蝇种下分化的研究。