野生型p53基因对U251细胞和脑肿瘤干细胞生长及放疗敏感性的影响

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目的:制作超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒,从脑胶质瘤细胞中诱导培养出BTSC,以上述制备的纳米颗粒为载体将wt-p53基因转染入U251及BTSC中,来研究野生型p53基因对U251细胞及BTSC生长及放疗敏感性的影响。方法:利用高温分解铁有机物法制备出超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒,并用γ-氨丙基三乙氧基硅烷对其表面修饰。从胶质瘤细胞中培养诱导出肿瘤干细胞,将得到的纳米颗粒与pYD5-P53质粒结合后导入U251细胞及肿瘤干细胞中。通过RT-PCR及Western印记法检测p53基因在转染细胞中的表达,用四甲基偶氮哇盐微量酶反应比色法(MTT法)检测基因p53对U251细胞及肿瘤干细胞生长的抑制以及它与放疗联合作用后的效果。结果:通过高温分解铁有机物法成功制备出超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒,与pYD5-P53质粒以1:1的比例结合转染入目标细胞中。通过RT-PCR及Western印记法证实了野生型p53基因在转染细胞中成功表达。MTT检测发现p53基因对U251细胞及肿瘤干细胞生长有明显的抑制作用,放射线疗法对U521细胞及肿瘤干细胞的抑制作用随着放射线强度的增加而增强,呈正相关。当野生型p53基因与放疗联合作用于U251细胞及肿瘤干细胞时,抑制率明显增加。结论:①高温分解铁有机物法可以成功制备出超顺磁性四氧化三铁纳米颗粒,它具有磁性强,制备简单,生物相容性好,单分散以及稳定等优良特点,与质粒结合性能好,转染成功率高,且转染后维持时间长,适合于生物医学研究。②脑胶质瘤细胞中可以培养诱导出肿瘤干细胞。③肿瘤干细胞较肿瘤细胞对放射线抵抗性明显增强。④野生型p53基因对U251细胞及肿瘤干细胞生长有抑制作用,与放疗联合有协同抑制作用。
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