循环肿瘤细胞分型检测及其在非小细胞肺癌中的应用研究

来源 :第三军医大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:RSH1987
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目的:通过对非小细胞肺癌患者(NSCLC)外周血中循环肿瘤细胞(CTCs)的计数和型别分布分析,探讨外周血CTCs的上皮-间质转换(EMT)情况及三种不同类型CTCs在非小细胞肺癌早期诊断、辅助TNM分期、预测远处转移中的作用。方法:采用CanPatrolTMCTC分型检测技术,基于滤膜法收集221例非小细胞肺癌患者、62例肺部良性疾病患者和20例健康志愿者外周血中的CTCs,通过mRNA原位杂交、分支DNA技术对循环肿瘤细胞内的上皮、间质标志物m RNA进行荧光检测,把CTCs分成上皮型、混合型、间质型三种类型,分析其与年龄、性别、TNM分期、远处转移的关系。利用判别分析方法,根据CTCs数量和分型判断被检测者是否为健康志愿者、肺部良性疾病患者或非小细胞肺癌患者,并判断非小细胞肺癌患者是否有远处转移。结果:1、间质型CTCs阳性比例和数量中位数在Ⅳ期非小细胞肺癌中分别是82.56%和3个,明显高于Ⅰ期非小细胞肺癌的36.30%和0个、肺部良性疾病的28.82%和0个、健康人群的14.29%和0个,P﹤0.05。2、利用上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs数量,诊断非小细胞癌患者是否远处转移,其特异度为84%(95%CI:77.57%90.43%),灵敏度为82.89%(95%CI:74.42%91.35%)。测试样本中,10名非远处转移NSCLC患者正确判断7人,10名远处转移NSCLC患者也正确判断7人。3、利用上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs数量区分健康人和非小细胞肺癌患者,其特异度为73.33%(95%CI:50.95%95.71%),灵敏度为63.98%(95%CI:57.5%70.46%)。利用上皮型CTCs和间质型CTCs数量区分肺部良性疾病患者和非小细胞肺癌患者,其特异度为53.85%(95%CI:40.3%67.4%),灵敏度为70.62%(95%CI:64.47%76.77%)。测试样本中,5名健康人正确判断出4人,10名肺部良性疾病患者正确判断出4人,10名非小细胞肺癌患者正确判断出7人。4、90.05%非小细胞肺癌患者检出CTCs,混合型CTCs检出比例最高。总CTCs、上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs数量与年龄和性别无关(P﹥0.05)。5、TNM分期越严重上皮型CTCs阳性率逐渐降低,而间质型CTC阳性率逐渐增加,P﹤0.01。逐步Logistic回归分析结果显示,上皮型CTCs和间质型CTCs是临床分期和远处转移的危险因素。结论:1、CanPatrolTMCTCs分型检测技术可以成功在非小细胞肺癌患者外周血中检测出上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs。2、上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs可在不同特征的非小细胞肺癌患者外周血中被检测出,且与患者性别和年龄无相关性。3、上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs在监测非小细胞肺癌患者是否转移上具有巨大的潜能,通过三个型别CTCs的数量判断NSCLC患者远处转移情况,特异度和灵敏度均在80%以上。4、上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs在非小细胞肺癌筛查和早期诊断具有较大的潜能,通过三个型别CTCs的数量判断被检测者是否为非小细胞肺癌患者,特异度和灵敏度良较好。5、上皮型CTCs、混合型CTCs和间质型CTCs,尤其是间质型CTCs,与NSCLC患者TNM分期、远处转移相关性强。
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