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随着经济的全球化发展和人们生活方式的改变以及人口的老龄化,糖尿病患者(主要是Ⅱ型糖尿病)的数量迅速增加。糖尿病已成为全世界许多国家的常见病和多发病,其死亡率仅次于肿瘤、心血管病。葡萄糖耐量因子(GTF)与传统中医药葛根的有机结合在防治糖尿病方面具有独特的优势。铬(Ⅲ)是保持GTF活性的必要成分,有降低血糖,改善胰岛细胞功能,增强胰岛素受体敏感性,维持机体正常糖耐量水平等作用;治疗糖尿病的传统中药葛根的主要成分葛根素具有扩张血管,改善微循环,降低血粘度等作用。 本论文采用微生物发酵法制备葡萄糖耐量因子与葛根素复合物,让两者共同发挥降血糖、降血脂的作用。采用发酵培养、火焰原子吸收法、高效液相色谱法、单因素实验分析等方法筛选出富铬情况比较好的菌株S.cerevisiae Y3和南瓜汁培养基,优化的发酵条件为接种量10%,初始pH5.0,培养基装液量10%,发酵液中铬离子浓度300μg/mL,培养温度28℃,转速200rpm,培养时间24h。优化的培养基为:南瓜果泥200 g/L,葡萄糖40 g/L,葛根药粉90g/L,不加蛋白胨、酵母膏。 对培养的富铬酵母部分性质进行研究。研究了酵母细胞转化无机铬为有机铬的能力,有机化程度达84%,紫外光谱分析证实了在260nm处有一紫外吸收峰,红外光谱分析表明铬的富集主要是酵母菌体中某些蛋白与铬作用的结果。 通过发酵培养,将无机铬转化为有机铬,同时从葛根中提取出葛根素。制备的富铬—葛根素复合物的生物量为3.3114g/100mL,有机铬的产量为699.53μg/100mL,葛根素的产量为10068.793μg/100mL。 在7L发酵罐中进行了初步放大发酵,富铬—葛根素复合物的生物量为1.4887g/100mL,有机铬产量为565.71μg/100mL,葛根素产量为4224.2μg/100mL。 通过本实验初步建立了一步制得富含GTF和葛根素的复方制剂方法,该方法生产周期短,生产成本低,工艺简单且有一定的环保意义。