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目的 组织细胞在低温下保存,由于没有足够的热能进行生化反应与代谢,因而能长期保存。然而要实现其低温保存,组织细胞却极容易遭受损伤。本研究拟对经低温保存的复合组织的血管蒂进行形态学研究,探讨三种方法低温保存复合组织的效果,为临床应用提供依据。 方法 选用32只健康Wistar大鼠随机分为四组,在手术显微镜下切取一侧后肢,经低温保护剂灌注后,对照组标本不进行低温冷冻,三个实验组标本分别采用(A组)直接放入液氮、(B组)经深低温冰箱降温后再放入液氮中、(C组)经程序降温仪降温后再放入液氮中三种方法低温保存一周后,经快速复温,切取血管蒂动脉,分别采用光镜、扫描电镜和透射电镜观察动脉内膜与管壁的形态结构,结果进行统计学处理。 结果 光镜观察A组与B组内皮细胞脱落及管壁损伤严重,C组内皮细胞及管壁保护良好,经统计学分析,A组(P<0.01)及B组(P<0.01)均与对照组存在显著差异;C组(P>0.05)与对照组无差异。扫描电镜观察:C组内皮细胞肿胀隆起,形态尚完整,细胞间连接无中断现象;A组与B组内皮细胞脱落,内皮下胶原纤维及内弹力膜暴露,A组部分内弹力膜不完整,平滑肌纤维暴露。透射电镜观察:C组超微结构得到较好保持;A组与B组内皮细胞脱落,溶解。 结论 ①复合组织的低温保存宜采用慢速冷冻保存法(二步法),尤其程序降温低温保存法可较好地保持血管蒂动脉的形态结构,玻璃化低温保存对血管壁的结构损害严重。②用二甲基亚砜处理,采用慢速冷冻保存法低温保存复合组织须选择最佳的降温速率。③不同组织块大小的复合组织其程序降温速率不同,此为临床研究同种异体复合组织的低温保存与移植具有重要参考意义。