论文部分内容阅读
本研究以肾阳虚证存在下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴(HPA)功能紊乱的本质为切入点,在课题前期药效学研究的基础上,观察肾气丸各拆方组对轻化可的松肾阳虚大鼠HPA轴相关指标的影响,通过检测灌胃后大鼠血浆中白介素1β(IL-1β)、白介素2(IL-2)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)与下丘脑中五羟色胺(5-HT)、多巴胺(DA)的含量,并测定肾气丸各拆方组药物水煎液中附子、桂枝、牡丹皮的有效成分乌头碱、桂皮醛、丹皮酚的含量,初步阐释肾气丸“阴中求阳”配伍治疗肾阳虚证的部分药效学机理和物质基础。将肾气丸拆方分为补阳组、补阴组、阴阳双补组。补阳1组由附子、桂枝组成;补阳2组由附子、桂枝+茯苓、泽泻、牡丹皮组成;补阴1组由生地黄、山茱萸、山药组成;补阴2组由生地黄、山茱萸、山药+茯苓、泽泻、牡丹皮组成;阴阳双补1组由附子、桂枝+生地黄、山茱萸、山药组成;阴阳双补2组由附子、桂枝+生地黄、山茱萸、山药+茯苓、泽泻、丹皮组成,即肾气丸全方组。将SD雄性大鼠,随机分为正常组、模型组、拆方肾气丸组(对应上述肾气丸分组),除正常组外,其余大鼠均每日大腿内侧肌肉注射氢化可的松25mg/kg,连续12天,同时开始灌胃给药,正常组、模型组给予等体积生理盐水。连续灌胃给药20天,于第21天上午8时麻醉大鼠,心脏取血5ml,静置,离心取上层血清,用ELISA法检测血清中IL-1β、IL-2、TNF-α、IFN-γ的含量;取下丘脑,称重,加5%高氯酸,匀浆,高速低温离心取上清液,用高效液相色谱法检测下丘脑中DA、5-HT的含量。按照上述肾气丸拆方分组,检测含有附子、桂枝、牡丹皮的拆方组水煎液中乌头碱、桂皮醛、丹皮酚的含量,分析不同配伍对其含量的影响,初步探讨肾气丸“阴中求阳”的物质基础。大鼠血浆中IL-1β、IL-2、IFN-γ、TNF-α的含量测定结果表明,与正常组比较,模型组IL-1β、IL-2的含量降低,经灌胃后,各拆方组大鼠血浆中二者的含量均有不同程度增加,其中阴阳双补2组含量高于补阳2组,阴阳双补1组含量高于补阳1组,且阴阳双补1组中IL-1β含量高于补阴1组,具有统计学意义。与正常组比较,模型组大鼠血浆中IFN—γ、TNF-α的含量降低,经灌胃后,各拆方组大鼠血浆中二者含量均有不同程度的增加,但各组间并没有明显差异。通过对大鼠下丘脑中DA、5-HT含量的测定,结果显示,与正常组相比,模型组大鼠下丘脑中DA、5-HT含量升高,经灌胃给药后,各拆方组大鼠下丘脑中DA、5-HT的含量均有不同程度的降低,以阴阳双补组含量最低,而补阳组降低不明显,其中阴阳双补1组含量低于补阳1组,阴阳双补2组含量低于补阳2组,具有统计学意义。通过对各含有桂枝的肾气丸拆方组水煎液中桂皮醛的含量进行测定,结果阴阳双补2组(肾气丸全方组)水煎液中桂皮醛含量高于补阳2组,其次阴阳双补1组水煎液中的含量高于补阳1组,且均具有统计学意义。而补阳组2含量高于补阳1组、肾气丸全方组含量高于阴阳双补1组,亦有统计学意义,即无论是纯补阳组还是阴阳双补组,加用“三泻”后药液中桂皮醛含量增高。对各含有牡丹皮的肾气丸拆方组水煎液中丹皮酚含量的检测,结果显示补阴2组、肾气丸全方组水煎液中丹皮酚含量较高,且阴阳双补组水煎液中的含量明显高于补阳组,且有统计学意义,虽然补阴2组含量较阴阳双补的肾气丸组高,但并无统计学意义。综合实验结果,我们认为增加血浆中IL-1β、IL-2的含量,以及降低下丘脑中多巴胺、五羟色胺的含量,都可能是肾气丸“阴中求阳”配伍治疗肾阳虚证的机理。桂皮醛、丹皮酚均可能是肾气丸“阴中求阳”的配伍在治疗肾阳虚证中发挥作用的有效成分。