淫羊藿苷对人牙周膜干细胞的增殖和成骨分化的影响

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目的:体外和体内分别研究淫羊藿苷(Icariin, ICA)对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)增殖及骨向分化的影响。方法:体外酶消化组织块法培养hPDLSCs,有限稀释法克隆化分离hPDLSCs,细胞表面标志物检测鉴定hPDLSCs。HPDLSCs与ICA共同培养,MTT法检测其增殖,ALP染色后酶联免疫仪检测其骨向分化,实时定量聚合酶链(real time PCR)检测成骨基因(RUNX2, C0L1A2, OPN, OCN)表达情况,茜素红染色检测其骨量表达。HPDLSCs和纳米--羟基磷灰石(nHA),各浓度ICA共同矿化诱导培养后,将其植入免疫缺陷鼠,60天后组织切片,HE染色,免疫组化观察成骨状况。结果:各浓度ICA作用于hPDLSCs后,实验组与对照组相比,hPDLSCs增殖明显;ALP表达量均升高明显;RUNX2, Collagenl, OPN, OCN表达明显增高;体内实验,1X 10-7 mol/LICA作用组,组织切片观察骨量增加最明显。结论:ICA可以明显促进hPDLSCs的增殖及骨向分化。其代替常规生长因子,应用于牙周组织工程具有一定可行性。
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