河南省部分城市猫泛白细胞减少症病毒分子流行病学调查

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猫泛白细胞减少症(Feline Panleukopenia,FP)又称为猫瘟热、猫细小病毒感染、猫传染性肠炎,是由猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)引起的猫及猫科动物的一种急性高度接触性、高死亡率的传染病,通常伴随着高热、呕吐、腹泻、脱水和白细胞总数急剧下降等特征。FPV感染宿主谱很广,在自然状态下,能感染几乎所有的猫科、鼬科及浣熊科动物,且引起猫、水貂、浣熊等动物很高的死亡率,尤其是近些年来该病严重影响着我国圈养大型野生猫科动物如雪豹、东北虎的健康。目前,我国是仅次于美国的宠物犬猫饲养大国,犬猫数量位居全球第二,2021年我国城镇猫数量为5262万只,对于猫泛白细胞减少症的预防依靠进口疫苗。目前国内猫疫苗仅有妙三多(猫三联灭活疫苗)一款,因为新冠肺炎疫情影响导致国内疫苗紧缺,国产猫疫苗的研发更加迫切且任重道远!目前针对我国猫泛白细胞减少症病毒的流行病学调查研究有限。本研究着重针对猫泛白细胞减少症在河南省郑州市、洛阳市和漯河市家猫中的流行情况、分子生物学特性及遗传变异情况进行深入研究,以期对FPV的治疗、防控以及新型疫苗的研发提供重要参考。本研究对2021年1月~12月份河南省郑州市、洛阳市和漯河市三市宠物医院及猫舍送检的1221份猫粪便样本,进行FPV PCR鉴定,结果显示:159份样品为FPV阳性,阳性率为13.02%,其中郑州的阳性率为12.16%(40/329),洛阳的阳性率为14.44%(26/187),漯河的阳性率为13.19%(93/705)。猫感染FPV具有季节性,冬春寒冷季节FPV感染率高,为15.49%~17.18%。未接种疫苗的幼猫对FPV更易感,但部分接种过疫苗的猫仍可检测出FPV阳性。本研究选取11个FPV阳性样本进行全基因组测序,对其VP2基因和NS1基因进行基因序列分析。结果显示11份样本的VP2基因与国内外FPV毒株VP2基因的相似性为98.8%~99.8%,与国内外CPV毒株VP2基因的相似性为97.6%~99.0%;基于NS1基因的相似性分析结果显示,11份样本的NS1基因与国内外FPV毒株NS1基因的相似性为98.9%~100%,与国内外CPV毒株NS1基因的相似性为98.4%~99.5%,表明FPV毒株之间、FPV毒株与CPV毒株之间的VP2基因和NS1基因较为保守。11份FPV阳性样本与FPV疫苗株、CPV疫苗株均不在同一遗传进化分支上,且相似性不高,该研究结果对FPV疫苗对我国流行毒株的保护效力提出了质疑,表明需要对目前商品化FPV疫苗的免疫效力进行评价,尽早针对性地研发出适用于国内流行毒株的FPV疫苗。取20份PCR结果为单纯FPV阳性的样本接种F81细胞进行病毒分离,有11份在细胞传代时出现CPE(细胞病变),如变圆、皱缩、脱落、拉丝等,将这11份细胞培养物进行PCR、电镜观察、免疫荧光实验(IFA)、病毒含量滴定等实验进行鉴定和验证,结果均表明这11分离株株为FPV。在动物回归实验中选择病毒含量滴定值最高的毒株FPV27进行动物回归实验,在实验中动物出现高热、食欲废绝、呕吐、腹泻、脱水、便血、死亡等症状,死亡率为100%,结果表明,FPV27株为对猫有较高致病力和致死力的强毒株。
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