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目的:在多种肿瘤中存在CHD5 ( chromodomain helicase DNA-binding 5)基因缺失、突变或甲基化,其中包括宫颈癌,该基因在抑制癌症发生发展中有重要作用。研究表明CHD5基因可通过p19Arf/p53、p16INK4a/pRb途径调控细胞增殖、衰老和凋亡。为了进一步了解CHD5基因与宫颈癌的关系,本文通过免疫组织化学方法检测CHD5基因在子宫颈组织中的表达,采用CHD5/RNAi的方法干预宫颈癌细胞HeLa,MTT方法和流式细胞术检测CHD5基因表达下调对宫颈癌细胞HeLa细胞增殖和细胞周期分布的影响,探讨CHD5与宫颈癌的关系。方法:1.采用免疫组织化学法检测宫颈癌及正常子宫颈组织中CHD5蛋白表达;2.针对CHD5基因设计siRNA序列,构建重组腺病毒载体。然后感染HeLa细胞,采用RT-PCR、western blot技术检测干扰效果;3.MTT法检测重组腺病毒感染HeLa细胞后细胞生长和增殖的变化,流式细胞术检测重组腺病毒对HeLa细胞周期分布的影响。结果:1.免疫组织化学检测发现CHD5蛋白在宫颈正常组织和宫颈癌癌旁组织中表达明显高于宫颈癌组织(P<0.05)。CHD5蛋白表达与临床病理特征数据未发现关联性。2.成功构建CHD5基因RNA干扰重组腺病毒,腺病毒滴度为5×1011pfu/ml,感染HeLa细胞后可降低CHD5表达。3.MTT检测表明,对CHD5基因进行干扰可促进HeLa细胞增殖(P<0.05)。流式细胞术结果显示感染CHD5siRNA重组腺病毒后,HeLa细胞周期发生变化,G0/G1期细胞减少(P<0.05),S期细胞增多(P<0.05),G2/M期细胞与对照组相比无统计学差异(P>0.05)。结论:1.CHD5蛋白宫颈癌中表达下调提示CHD5表达水平与宫颈癌的发生密切相关。2.CHD5siRNA重组腺病毒构建成功。3.CHD5siRNA重组腺病毒感染HeLa细胞结果提示宫颈癌的发生可能与CHD5表达下调导致HeLa细胞更容易通过G1/S检验点进入S期,引起细胞增殖过度有关。