多糖是生物体内不可缺少的生物大分子,其结构的型式及各种生物活性特征,使之具备作为药物载体的潜质,因此多糖与药物的相互作用研究具有重要意义。由于毛细管电泳具有分析速度快,准确性好,所用溶液体系接近生物溶液组成,可以得到较真实的分子间相互作用信息等优势,所以目前用于多糖与药物的相互作用研究方法最多。据此,本研究提出将毛细管电泳峰漂移法和配体分离法应用于天然多糖与抗肿瘤药物的相互作用研究,并采用Scatchard方程计算其结合常数,为载药时天然多糖分子量及释药部位的选择提供理论依据。相关研究可以提供用以评价多糖作为药物载体的可行性和效能多糖与药物的相互作用程度数据,在药物载体的筛选和评价等方面具有明确的研究价值和实用意义。本文的主要研究工作及结果如下:1.采用毛细管电泳峰漂移法研究了β-环糊精与5-氟尿嘧啶的相互作用。实验构建了β-环糊精和5-氟尿嘧啶相互作用体系,用毛细管电泳峰漂移模型测试了系列浓度β-环糊精与5-氟尿嘧啶在三个不同pH环境下相互作用的电泳图谱,采用Scatchard计算模型获得了三种条件下的结合常数。结果显示β-环糊精与5-氟尿嘧啶在酸性条件下,其相互作用时最强,结合常数是232.5;在碱性条件下,其相互作用较弱,结合常数是84.24;在中性条件下,几乎没有结合。另外,Scatchard方程线性回归作图线性良好,表明两者为1:1结合。2.采用毛细管电泳峰漂移法研究了壳聚糖与5-氟尿嘧啶相互作用。实验构建了壳聚糖和5-氟尿嘧啶相互作用体系,用毛细管电泳峰漂移模型测试了不同分子量的系列浓度壳聚糖与5-氟尿嘧啶相互作用的电泳图谱,采用Scatchard计算模型求解获得了两种分子量的结合常数。结果显示壳聚糖与5-氟尿嘧啶的结合常数是5.625×10~3,壳寡糖与5-氟尿嘧啶的结合常数是5.608×10~4。壳寡糖与5-氟尿嘧啶的结合常数比壳聚糖大一个数量级,说明不同分子量的壳聚糖与5-氟尿嘧啶的相互作用力的大小是不同的,分子量较小壳寡糖更易于与壳聚糖发生相互作用。这是由于分子量大的壳聚糖较分子量小的壳寡糖空间位阻更大,同时分子量小的壳寡糖,有更多的活性修饰位点,故壳寡糖比壳聚糖更容易与5-氟尿嘧啶结合。另外,Scatchard方程线性回归作图线性良好,表明两者为1:1结合。3.采用毛细管电泳峰漂移法和配体分离法研究了寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶及其衍生物的相互作用。实验构建了寡聚透明质酸和5-氟尿嘧啶相互作用体系,用毛细管电泳峰漂移模型测试了系列浓度的寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶及其衍生物相互作用的电泳图谱,同时用毛细管电泳配体分离法,测试计算了寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶衍生物的结合常数,采用Scatchard计算模型获得了三种pH条件下的结合常数。结果显示酸性条件下寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶的结合常数是726.5,碱性条件下是672.3,Scatchard方程线性回归图线性良好,表明两者为1:1结合;中性条件下并未得到线性关系,判断为在此条件下两者未结合。测试的寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶衍生物的相互作用,线性回归相关性不佳,判断其可能不是1:1结合,峰漂移模型不适合进一步分析。进一步考虑用毛细管电泳配体分离法,测试电泳图谱后采用Scatchard方程,进一步计算得到寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶衍生物的结合常数分别为5.7847×10~7和1.3595×10~7,说明寡聚透明质酸与5-氟尿嘧啶衍生物在化学键合的情况下两者为多位点结合。4.采用毛细管电泳峰漂移法对款冬花均一多糖与5-氟尿嘧啶相互作用进行了探索。实验采用水提醇沉法制备得到款冬花各级醇沉粗多糖(TFP、TFP1、TFP2、TFP3),采用DPPH法从分子水平上评价了这三种的抗氧化活性,选用最强氧化活性TFP2进一步纯化得到3种均一多糖,筛选含糖醛酸量最大为20.16%的TFP2-2进行与5-氟尿嘧啶作为研究对象,构建款冬花均一多糖与5-氟尿嘧啶及其衍生物相互作用体系,用毛细管电泳峰漂移模型测试得到了其电泳图谱,采用Scatchard计算模型求解结合常数。结果显示TFP2-2与5-氟尿嘧啶的结合常数是9.886×10~4,相关系数良好,两者为1:1结合。结合常数说明TFP2-2与5-氟尿嘧啶的结合较强,属于快结合类型,TFP2-2可作为药物载体开展进一步的研究。相关研究结果显示出植物多糖作为载体的可行性,同时也为植物多糖的综合利用提供了依据和相关基础信息。