四川大豆根瘤菌匹配菌株的筛选及抗逆、促生特性研究

来源 :四川农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lidandanlidd12141
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根瘤菌剂在四川生产和应用潜力较大。筛选出与四川主栽大豆品种匹配性好的高效菌株并将其制作成菌剂代替部分氮肥的使用具有增加大豆产量,减少环境污染的现实意义。本试验将前期工作分离获得的170个大豆根瘤菌作为供试菌株,与四川主栽大豆品种“南豆12”进行回接试验(微氮水培法),筛选出结瘤能力好,植株干重大的菌株,再将筛选菌株与四川其他主栽大豆品种“贡选1号”、“射洪地方品种”和“川豆14”进行匹配性试验,同时对筛选菌株的促生性、抗逆性、耐微量元素能力进行检测,最后得到结瘤固氮能力强,匹配性好,促生、抗逆和耐微量元素能力强的根瘤菌。(1)由于菌株多,回接试验分2次进行,第一次试验81个菌株,第二次89个菌株。第一次回接试验显示,81个菌株中,结瘤菌株为73株,结瘤数为:0.7-48个/株。植株干重为0.43~0.96g/株,干重大于CK干重的有46株(56.8%),13株(14.5%)与CK呈现显著差异。结合植株干重和结瘤数,第一批回接试验共初筛13个菌株。第二次回接试验显示,89个菌株全部结瘤,结瘤数为11.7-58.3个/株。植株干重为0.38-1.18g/株。干重大于CK的有71株(79.8%),与CK呈现显著差异的有9株(11.1%)。结合植株干重和结瘤数,第二次回接试验筛选9个菌株,两次回接试验共筛选出22个菌株:SS23、S20、 S40、SS39、 SS37、S12、SS58、SS50、S35、S43、SS18、S119、slzl-3、SS41、SS22、S126、 S114、S85、SS16、S82、S3、S1。将这22个菌株作为与其他豆种进行匹配性试验,同时进行促生性、抗逆性的检测的供试菌株(2)对22个供试菌株进行匹配性试验。与“贡选1号”匹配试验显示,22个菌株结瘤数为1-36个/株。干重与CK呈显著差异的有5个,分别是S20、 S3、S82、SS58、S35匹配效果最好。在与“射洪地方品种”匹配试验中,菌株结瘤数为4~44个/株,干重大于CK的处理有14个,增幅为3.4%~60.3%,S114、S34、S82、SS16和S119与CK呈显著差异,匹配效果最好。与“川豆14”匹配试验显示,22个处理全部结瘤,结瘤数为3-49个/株。植株干重在0.42-1.29g/株之间,植株干重与CK呈显著差异的有5个处理:S82、S35、SS39、 SS22、S119,匹配效果最好。(3)对筛选菌株进行促生、抗逆特性和微量元素耐性的研究。在酸碱耐受性试验表明,在pH4.0的YMA培养基中,菌株S119和S114可以生长,90.1%的菌株能在pH5.0时生长,95.5%的菌株能在pH6.0时生长。在pHH12.0的培养基中可以生长的菌株有13个,其余根瘤菌均可在pH5~11培养基中生长,对酸碱都有一定耐受性。耐盐性测定显示,所有菌株均可在0.5%NaCl上生长,有18个(81.8%)菌株能在1%NaCl平板上生长,17个(77.3%)菌株能在2%NaCl生长,15个(68.2%)菌株能在3%NaCl生长,12个(54.5%)菌株能在4%NaCl生长,所有菌株均不能在5%NaCl中生长。生长温度范围测定表明,除SS58、SS37外,其余根瘤菌在10℃下均能生长;全部处理均能在20℃下生长;SS16、S35、S12、S114在40℃高温下仍表现活力,表现出较强抗热性;在60℃热激处理半小时后,28℃下培养,菌株S43和S3失去活力。微量元素耐性测试显示,供试菌株在钼酸铵培养基中活力较强,有16个(72.7%)的处理都能在1%钼酸铵平板中生长,不能忍受的菌株为有6个;所有菌株均可在0.8%以下钼酸铵中生长。供试菌株在0.02%~0.08%下硼酸均能生长,在0.10%浓度下有21个(95.5%)处理都能表现活力,SS39未生长;在硫酸亚铁培养基中菌株活力较差,0.1%硫酸亚铁中有17个(77.3%)处理可以生长,在0.30%硫酸亚铁中仅有2个(0.91%)处理表现活力,长势较差,在0.60%和1%硫酸亚铁中则全部不能生长。溶解磷、解钾能力测试中,结合三种无机磷源来看,解无机磷能力最强的菌株有SS37、SS50,解有机磷能力最好的菌株为S35,S12和S119次之,解钾效果最好的供试菌株则是S1、SS22、SS37、S82。分泌IAA试验中,供试菌株中能够分泌IAA的菌株有16个(72.7%),分泌IAA量达到100ppm以上的菌株为SS50、S1、S35、S114,50~100ppm的菌株有5个(22.7%),30~50ppm的菌株有2个(9.1%),10-30ppm的菌株有4个(18.2%),有6个(27.3%)菌株不能分泌IAA。与“南豆12”回接试验筛选出的22个菌株,与“贡选1号”匹配较好的是S20、S3、S35、S82、SS58,与地方品种匹配较好的是S114、S35、S82、S119和SS16,与“川豆14”匹配较好的是S119、SS22、S35、S39、S82。匹配能力最强的菌株是S82、S35和S119。S82和S35与4个豆种匹配均高效,2者耐pH范围是4~12,S35耐盐性强(4%NaCl),S82很弱,只能在0.5%NaCl中生长,S35能耐高温,在40℃中能生长,S82则不能,S35微量元素耐性很强,在1%钼酸铵和0.3%硫酸亚铁中可以生长,S82微量元素耐性较强,S35解有机磷能力最强,不能解磷酸铁无机磷源,S82不能解有机磷,S35分泌IAA能力很强,在100ppm以上,S82分泌IAA浓度在10~30ppm的范围。
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