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目的应用谷氨酸(glutamate, Glu)细胞损伤模型来研究施普善(Cerebrolysin)是否可以有效地保护细胞,并探讨其保护机制。方法应用SH-SY5Y神经细胞系来建立可靠的Glu损伤模型。采用噻唑兰(methyl-thiazole-tetrazolium, MTT)细胞活性的测定、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase, LDH)检测的方法研究Cerebrolysin是否具有细胞保护作用。应用细胞内钙离子测定、细胞内活性氧(reactive oxygen species, ROS)测定、细胞培养基超氧化物岐化酶(superoxide dismutase, SOD)、丙二醛(malonaldehyde, MDA)含量测定和细胞线粒体膜电位(mitochondrion membrane potential, MMP)测定等方法进一步探讨Cerebrolysin细胞保护作用的机制。结果1.80mM Glu处理细胞24h后MTT测定数据表明细胞存活率为51.233±3.019%；单独给予细胞4、8、10和20m1／L的Cerebrolysin对细胞存活没有显著影响。2.4、8、10和20ml/L Cerebrolysin和80mM Glu共同处理细胞24h后细胞的存活率分别为48.739±5.786%、71.863±16.821%、75.767±12.454%和71.814±11.788%,其中l0ml／L浓度Cerebrolysin细胞保护作用最好。3.与正常对照组比较(544.670±5.126 U／L),80mM Glu组细胞培养基LDH含量显著增加(835.552±51.530U／L)；与80mM Glu组比较,10ml/L Cerebrolysin加80mM Glu组细胞培养基LDH含量显著降低(680.222±66.688 U／L,P<0.05)。4.与正常对照组比较(28.328±5.286),10ml/L Cerebrolysin对细胞内钙离子荧光没有显著影响(32.523±7.514)；80mM Glu引起细胞内钙离子荧光显著增加(72.434±12.735,P<0.001)；10ml/L Cerebrolysin可以抑制Glu引起的细胞内钙离子荧光增加(53.309±12.626,P<0.001)。5.与正常对照组(94.356±13.417)比较,单独给予细胞10ml/L Cerebrolysin24h可以显著提高线粒体荧光(115.856±9.425,P＜0.001),同时可见细胞线粒体明显增多,分支增加；而80mM Glu处理细胞24h线粒体荧光显著降低(90.281±9.438,P<0.05)；10ml/L Cerebrolysin和80mM Glu共同处理细胞24h后线粒体荧光显著增加(102.847±13.338,P<0.001),同时可见细胞线粒体明显增多,分支增加。6.与正常对照组(20.436±1.762 U／m1)比较,80mM Glu处理细胞24h后培养基中SOD酶的含量显著降低(5.816±1.154 U／ml,P<0.001)；10ml／L的Cerebrolysin对细胞培养基SOD酶的含量没有显著影响(21.588±1.051 U／m1)；10ml／L的Cerebrolysin可以显著抑制80mM Glu引起的细胞培养基SOD酶含量的降低(14.810±1.955 U／ml,P<0.001)。7.与正常对照组(0.989±0.224μmol／L)比较,80mM Glu处理细胞24h后培养基中MDA的含量显著增加(11.138±0.942μmol／L,P<0.001)；10ml／L的Cerebrolysin对细胞培养基MDA的含量没有显著影响(1.071±0.337μmol／L)；l0ml／L的Cerebrolysin可以显著抑制80mM Glu引起的细胞培养基MDA含量的增加(4.424±0.772μmol／L,P<0.001)。8.与正常对照组细胞ROS荧光(39.112±15.283)比较,80mM Glu处理组显著增高(123.058±33.007,P<0.001)；与80mM Glu处理组比较,l0ml／LCerebrolysin和Glu共同处理组细胞ROS荧光显著降低(95.707±28.703,P<0.001)。结论1.单独应用4、8、10、20m1／L浓度的Cerebrolysin对SH-SY5Y细胞存活率没有显著影响。2.10ml／L的Cerebrolysin可以通过抑制80mM Glu引起的SH-SY5Y细胞内钙离子、ROS和MDA含量的增加,提高SH-SY5Y细胞SOD酶的含量,降低SH-SY5Y细胞过氧化反应来抑制Glu引起的细胞损伤。3. Cerebrolysin可以显著提高SH-SY5Y细胞MMP,同时线粒体形态发生改变,这一变化是否参与了Cerebrolysin抑制Glu引起的细胞损伤及其机制依然不祥。