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植物乳杆菌Lactobacillus plantarum LT2-6为实验室筛选所得,具有转化亚油酸(LinoleicAcid, LA)生成共轭亚油酸(Conjugated Linoleic Acid, CLA)的催化能力。乳杆菌LT2-6在适宜条件下培养24 h后离心,所得菌体用生理盐水或缓沖液洗涤离心收集得LT2-6的洗涤细胞,利用该乳杆菌的洗涤细胞即完整细胞能有效转化生成CLA。 本论文主要研究了LT2-6洗涤细胞的催化性能及其转化生成CLA的途径,并借助气相色谱对最终产物进行了脂肪酸成分检测。 研究结果表明:在以游离亚油酸为底物时,LT2-6的洗涤细胞在优化的反应条件下(0.1M磷酸缓冲液,pH 7.0,30℃,120 r/min)具有较强的催化能力,10%(w/v)的洗涤细胞在48 h内从6mg/mL亚油酸中转化生成4.628mg/mL CLA,转化率达77.1%;20%(w/v)的洗涤细胞在64 h内从15mg/mL亚油酸中转化生成7.861mg/mL CLA,转化率达52.4%;气相色谱结果显示产物CLA主要为cis-,trans-9, 11-CLA。在胰脂酶协助下,LT2-6的洗涤细胞(15%,w/v)在优化条件下(0.1M柠檬酸缓冲液,pH 6.0,30℃,120 r/min,72 h)能将豆油(15mg/mL)中以甘油酯形式存在的亚油酸有效转化为CLA,基于豆油中的亚油酸含量其转化率可达54%。 论文还研究了固定化L.plantarum LT2-6细胞的催化性能。研究发现,采用海藻酸钠包埋法所得的固定化细胞能保留较好的催化能力。在优化条件下即0.6g细胞/g海藻酸钠载体、50mM的Tris-HCl缓冲液(pH 8.0)和37℃,固定化细胞在24 h内能从lmg/mL亚油酸转化生成0.271mg/mL CLA,转化率为27.1%。对固定化细胞循环使用的研究表明,pH 7.5和25℃是固定化细胞循环反应生成CLA的有效pH值和有效温度。有机体系中细胞转化反应的初探实验显示细胞的催化能力与体系中的水分含量有关。