球孢白僵菌对葱蝇的致病性和控制潜能研究

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葱蝇Delia antiqua(Meigen)是一种分布在北半球温带地区的毁灭性害虫,利用球孢白僵菌技术是防治葱蝇的重要措施之一。本文主要以葱蝇和球孢白僵菌为研究对象,通过室内菌株初筛,生物测定,筛选出对葱蝇成虫高毒的球孢白僵菌菌株;用扫描电镜和荧光显微镜对球孢白僵菌在葱蝇虫体的侵染部位和侵染进程进行了观察;通过对球孢白僵菌侵染后葱蝇成虫重要的生理指标和血淋巴中游离氨基酸和糖类等的影响,探讨了球孢白僵菌对葱蝇的致病性;通过对球孢白僵菌侵染后,葱蝇虫体防御酶类和血细胞的变化,分析葱蝇对球孢白僵菌的防御反应;用比较群体饲养两性生命表的方法分析了球孢白僵菌对葱蝇后代的亚致死影响;对葱蝇幼虫室内生测方法进行改进,筛选出对葱蝇幼虫的高毒力菌株;进行罩笼实验,探索球孢白僵菌对葱蝇的控制潜能和最佳的施用方式。全文的主要结果如下:1、对葱蝇成虫高毒的球孢白僵菌菌株筛选对45株不同来源的球孢白僵菌菌株进行了初筛,测定侵染后葱蝇成虫的累计校正死亡率和致死中时(LT50),其中累计死亡率高于85%且LT50小于6d的菌株有8株;对这8株菌株进行室内生物测定,筛选出3株LC50最小,致病效果最好的菌株,分别为:XJWLMQ-32,GZGY-1-3与SDDZ-9,三株菌株的LC50分别是3.87×103,6.64×103,4.95×103孢子/mL。2、球孢白僵菌对葱蝇的侵染观察用扫描电镜对球孢白僵菌侵染葱蝇成虫的侵染过程和部位进行观察,发现72h内,分生孢子可以完成整个的侵染过程;同时葱蝇体表浓密的细小刚毛可以阻止分生孢子的附着,而刚毛比较稀疏的翅和葱蝇大刚毛上的褶皱处则是分生孢子附着和侵染的主要部位。3、球孢白僵菌侵染后葱蝇成虫的生理变化球孢白僵菌的侵染,引起虫体含水量、体重增量以及脂质含量下降,同时,进入血淋巴的菌丝不断的增殖,会引起血淋巴中的蛋白质呈现先上升后下降的趋势,游离氨基酸总量先下降后上升然后持续下降,几种重要的游离氨基酸含量会有不同的变化趋势;血淋巴中的海藻糖含量呈先上升后大幅下降的趋势,葡萄糖的含量呈现波动变化。4、球孢白僵菌侵染后葱蝇的防御反应球孢白僵菌侵染后,虫体内SOD,CAT,POD,GSTs和ACh E的比活力呈先上升后下降的趋势;处理组虫体内的CarE比活力和对照组的变化趋势相同,但始终低于对照组。侵染36-48 h大量的血细胞在菌丝体周围集结,包囊,阻碍和抑制菌丝的增殖。侵染54 h后,菌丝开始突破包囊块,在血淋巴中大量增殖,血细胞免疫被破坏。球孢白僵菌侵染初期会触发葱蝇成虫的免疫系统,但由于菌丝的大量增殖,后期免疫系统崩溃,导致成虫死亡。5、球孢白僵菌对葱蝇后代生命表参数的亚致死影响我们评估了亲代葱蝇成虫被球孢白僵菌侵染后对子代生命特征的影响。球孢白僵菌侵染成虫后的后代种群,相比于对照来说卵期和蛹期没有显著变化,幼虫期显著缩短,繁殖率显著下降,但是球孢白僵菌处理后的雄虫的寿命显著缩短。平均世代时间(T)增加,内禀增长率(r),周限增长率(λ),净增值率(R0)均显著降低,种群增长速度变慢。6、对葱蝇幼虫高毒的球孢白僵菌菌株筛选对葱蝇幼虫的室内生测方法进行改进,室内条件下测定8株球孢白僵菌菌株对葱蝇老熟幼虫的毒力。所有菌株对成虫羽化率的降低有显著影响。参考菌株F52造成葱蝇的羽化率降低39.13%。球孢白僵菌菌株NMTL-1,NMTL-27,造成成虫羽化率分别降低73.91%和67.39%,菌株XJWLMQ-32造成成虫羽化率降低39.13%。7、球孢白僵菌对葱蝇的控制潜能评价罩笼实验中,分别喷施可湿性粉剂、孢子悬浮液与土壤撒施麦麸菌粉,分别持续观察对葱蝇成虫和幼虫的致病效果。结果显示土壤撒施菌粉对葱蝇幼虫和成虫有控制潜能。
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