芳香化酶抑制剂对涎腺腺样囊性癌ACC-83细胞影响的实验研究

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目的:利用转基因技术构建腺样囊性癌细胞株ACC-83-CYP19,观测芳香化酶抑制剂对转基因涎腺腺样囊性癌ACC-83-CYP19细胞的影响,为临床内分泌法治疗涎腺涎腺腺样囊性癌提供科学理论依据。材料与方法:1、免疫细胞化学方法分别检测ACC-83、ACC-LM、ACC-2细胞系中芳香化酶的表达情况。2、利用基因转染技术构建重组ACC-83-CYP19细胞,通过Western blot检测芳香化酶表达情况。3、利用不同浓度芳香化酶抑制剂对ACC-83细胞和重组ACC-83-CYP19细胞进行处理,MTT和流式细胞术分别检测ACC-83细胞和重组ACC-83-CYP19细胞的增殖和凋亡情况,Western blot检测实验组与对照组芳香化酶表达的变化情况。空白对照组添加溶媒DMSO,不添加药物。结果:1、免疫细胞化学分别检测ACC-2、ACC-LM、ACC-83细胞株,结果显示ACC-2、ACC-LM、ACC-83细胞的胞浆内存在芳香化酶P450的表达。2、抗生素G418筛选ACC-83-CYP19细胞后,通过Western blot检测芳香化酶表达,ACC-83-CYP19细胞的芳香化酶P450的表达高于未转染的ACC-83细胞。3、通过MTT检测,结果显示在25nmol/L、50nmol/L、100nmol/L、200nmol/L的来曲唑药物浓度作用下,ACC-83-CYP19细胞抑制率分别为62.93%、74.82%、82.50%、85.51%、ACC-83细胞的抑制率分别为65.27%、69.71%、70.59%、67.43%,差异具有统计学意义;芳香化酶抑制剂对涎腺腺样囊性癌细胞具有抑制细胞生长作用。4、流式细胞术检测ACC-83和ACC-83-CYP19细胞的凋亡情况,结果显示来曲唑对ACC-83和ACC-83-CYP19细胞有促进细胞凋亡的作用,细胞凋亡率随着药物浓度增大而增大。5、来曲唑可降低ACC-83-CYP19和ACC-83细胞中芳香化酶的表达。结论:1、涎腺腺样囊性癌细胞株ACC-83, ACC-LM,ACC-2中存在芳香化酶的阳性表达,腺样囊性癌的发生可能与芳香化酶的异常表达有关。2、来曲唑对ACC-83和ACC-83-CYP19细胞促进凋亡作用有促进凋亡,抑制增殖作用。
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