反相高效液相色谱(RP-HPLC)已被广泛应用于许多领域如分析化学、生物化学、临床医学、药物化学、食品卫生和环境监测等。其超强的分离能力使之已成为分析化学中发展最快、应用最广的研究领域之一。然而,对于反相液相色谱并没有合适的高灵敏的通用型检测器,多年来研究人员一直采用化学衍生化的方法来提高分析物检测灵敏度和改善分离效果。新型荧光探针分子的开发及其在高效液相色谱中的应用研究一直是色谱领域中最为活跃的研究方向。本论文以修饰现有母体环及展现其广泛应用性为主导思想,对现有荧光探针分子修饰过程及结构确定、光谱性质、衍生化反应条件、色谱分离条件、质谱定性定量分析等方面进行了研究,建立相应的反相高效液相色谱分析方法,并应用于多种有意义的实际样品的分析中。具体工作内容如下：第一章：简述了高效液相色谱和高液相色谱-质谱联用技术的研究进展,简单介绍了化学衍生化、影响荧光衍生物荧光强度的因素及荧光探针分子的特点。最后列出了近几十年来常用的标记胺类和醇类物质的荧光试剂。第二章：新修饰的荧光标记试剂DBCEC-Cl用于生物胺的高效液相色谱分析,用响应面分析法对衍生化条件进行了优化,建立了生物胺的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于实际样品腐鱼和臭豆腐的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。第三章：DBCEIC中间体的合成及表征,以此作为标记试剂,用于脂肪胺的高效液相色谱分析。通过对衍生化条件的优化,建立了脂肪胺的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于实际样品药厂废水的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。第四章：ABIA的合成及表征,研究了试剂的光谱性质,以此作为标记试剂,用于脂肪胺和脂肪醇的高效液相色谱分析。通过对衍生化条件的优化,分别建立了脂肪胺和脂肪醇的柱前衍生高效液相色谱荧光检测法,并将该方法用于实际样品的测定,检验了所建立的分析方法的可行性。