水泡口炎病毒(VSV)基质蛋白(M)抗肿瘤作用研究

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水泡口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)是弹状病毒科的原型病毒,为有包膜的负链RNA病毒。由于它可以在肿瘤细胞中选择性复制而被用于肿瘤治疗,在多种肿瘤模型中都表现出明显的抗肿瘤作用,因此VSV是一种较有前途的溶瘤病毒。但可复制的溶瘤病毒应用于肿留临床治疗始终存在着安全隐患,因此有必要探寻更为安全的利用病毒治疗肿瘤的方法。文献报道,在VSV病毒编码的五种蛋白中基质(Matrixprotein,M)蛋白在VSV诱导的细胞病变中起着重要的作用,如:引起细胞变圆和细胞凋亡,而且在没有VSV其他蛋白成分存在的情况下M蛋白仍然可以引起细胞这些特征性病变。基于M蛋白的这一重要功能,同时为了避免复制完全型病毒在临床治疗中可能面临的诸多问题,我们设想将VSV病毒的功能基因—M蛋白基因用于肿瘤的基因治疗研究中,通过其诱导肿瘤细胞凋亡,从而达到抗肿瘤效应。同时M蛋白基因导入机体后表达的M蛋白又可以激发机体的抗肿瘤免疫反应,从而使M蛋白的抗肿瘤作用增强。 为了探讨这一假设,我们构建了含有VSV M蛋白基因的真核表达质粒pcDNA3.1(+)-M,简称为(p-m),经酶切、RT-PCR测序鉴定M基因插
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