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贻贝是生活在潮间带的重要生物类群。近年来,随着全球气候变暖,贻贝的分布范围发生了变化。贻贝对温度生理上适应性的不同可能与其分布范围的变化紧密相关。但是温度胁迫对贻贝的影响及其响应温度胁迫的机制目前尚不清楚。本论文研究了温度胁迫对厚壳贻贝和紫贻贝血细胞DNA损伤的影响,并获得了细胞凋亡相关基因caspase-8,Rel,Bcl-2,Bax以及Cyto C基因的全长cDNA序列,分析了其结构特征、组织表达以及应对温度胁迫的表达变化,结果如下:(1)低温或者高温胁迫都能够使厚壳贻贝和紫贻贝血细胞中DNA单链损伤和双链损伤的程度增加,并且这种损伤的增加是依赖于时间和温度的。其中紫贻贝血细胞单链损伤对低温胁迫较为敏感,而厚壳贻贝的损伤程度在受到高温及低温胁迫后,均发生明显损伤。(2)厚壳贻贝caspase-8基因cDNA全长1884bp,包括1506bp的ORF,编码501个氨基酸;紫贻贝caspase-8基因cDNA全长1775bp,包括1488bp的ORF,编码495个氨基酸。序列分析显示两种贻贝caspase-8都包含DED结构域,CASPASEP20结构域和CASPASEP10结构域。Caspase家族特征蛋白序列KPKLFFIQACQG分别位于氨基酸348-359位和345-356位。厚壳贻贝和紫贻贝caspase-8基因在所检测的组织中有不同程度的表达,厚壳贻贝在外套膜中表达量最高,消化腺中表达量最低;紫贻贝在消化腺中表达量最高,肌肉中表达量最低。低温2℃胁迫,厚壳贻贝鳃,厚壳贻贝血,紫贻贝鳃中caspase-8酶活显著升高;低温6℃胁迫,紫贻贝鳃,紫贻贝血caspase-8 mRNA表达显著升高,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝鳃、血caspase-8酶活显著升高。高温28℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝血mRNA表达显著升高,厚壳贻贝鳃,紫贻贝鳃caspase-8酶活显著升高;高温32℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝鳃、血mRNA表达显著升高,厚壳贻贝鳃,紫贻贝鳃、血caspase-8酶活显著升高。(3)厚壳贻贝Rel基因cDNA全长2981bp,包括1788bp的ORF,编码595个氨基酸;紫贻贝Rel基因cDNA全长2985bp,包括1794bp的ORF,编码597个氨基酸。序列分析显示两种贻贝Rel都包含RHD结构域和IPT结构域。NF-κB家族Rel蛋白特征序列(FRYXCE)分别位于氨基酸的105-110位和107-112位。厚壳贻贝和紫贻贝Rel基因在所检测的组织中有不同程度的表达,厚壳贻贝在外套膜中表达量最高,在血液中表达量最低;紫贻贝在鳃中表达量最高,在消化腺中表达量最低。低温2℃胁迫,厚壳贻贝鳃Rel表达量显著升高;低温6℃胁迫,厚壳贻贝鳃,紫贻贝鳃Rel表达量显著升高;高温28℃胁迫,厚壳贻贝血,紫贻贝鳃Rel表达量显著升高;32℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝鳃、血Rel表达量显著升高。(4)厚壳贻贝Bcl-2基因cDNA全长784bp,包含558bp的ORF,编码185个氨基酸。序列分析显示厚壳贻贝Bcl-2包含BH42结构域和BCL2FAMILY结构域。厚壳贻贝和紫贻贝Bcl-2基因在所检测的组织中有不同程度的表达,厚壳贻贝和紫贻贝Bcl-2基因在性腺和鳃中的表达量较高,而在血液中表达量最低。低温2℃胁迫,厚壳贻贝血Bcl-2表达量显著升高;低温6℃和高温28℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝鳃、血Bcl-2表达量显著升高;高温32℃胁迫,厚壳贻贝血,紫贻贝鳃、血Bcl-2表达量显著升高。(5)厚壳贻贝Bax基因cDNA全长766bp,包含630bp的ORF,可以编码209个氨基酸。序列分析显示厚壳贻贝Bax包含一个BCL2FAMILY结构域。厚壳贻贝和紫贻贝Bax基因在所检测的组织中有不同程度的表达,厚壳贻贝Bax在消化腺和肌肉中的表达量较高,在鳃中表达量最低;紫贻贝Bax基因在外套膜和肌肉中的表达量较高,在血细胞中表达量最低。低温2℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝血Bax表达量显著升高;低温6℃和高温28℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝鳃、血Bax表达量显著升高;高温32℃胁迫,厚壳贻贝血,紫贻贝鳃、血Bax表达量显著升高。(6)厚壳贻贝Cyto C基因cDNA全长637bp,包含333bp的ORF,可以编码110个氨基酸。序列分析显示厚壳贻贝Cyto C包含一个CYTC结构域。Cys20和Cys23是血红素共价结合位点;His24是铁离子配体结合位点。厚壳贻贝和紫贻贝Cyto C基因在所检测的组织中有不同程度的表达,厚壳贻贝Cyto C基因在性腺和外套膜中的表达量较高,在血细胞中表达量最低;紫贻贝Cyto C基因在外套膜中的表达量最高,在消化腺中表达量最低。低温2℃胁迫,厚壳贻贝和紫贻贝鳃中Cyto C表达量显著升高;低温6℃胁迫,紫贻贝鳃、血Cyto C表达量显著升高;高温28℃胁迫,厚壳贻贝鳃、血,紫贻贝鳃、血Cyto C表达量显著升高。