阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease, AD)是继心脏病、肿瘤、中风之后,成为人类死亡的第四大死因,严重危害到老年人身体健康。研究发现,载脂蛋白E(apolipoprotein E, ApoE)与AD高度相关。因此,本研究以广西巴马小型猪为研究对象,测定了ApoE在不同组织、不同年龄和大脑不同部位的表达模式；构建ApoE真核表达载体并对其功能进行验证,同时进行转ApoE基因小鼠的生产,为后续构建广西巴马小型猪AD动物模型的研究奠定基础。根据GenBank公布的猪ApoE cDNA序列设计特异引物,利用RT-PCR (reverse transcription PCR, RT-PCR)分析广西巴马小型猪ApoE在心、脾、肝、肾、胰和脑等组织中的表达情况,并测定了ApoE在不同年龄(10,14,24,>24月龄)猪脑组织中的表达模式。结果发现ApoE在脑和胰腺中的表达最高；老年(>24月龄)猪脑组织中ApoE的表达量高于其它年龄；免疫组化的结果显示,ApoE在前脑皮质的表达量高于海马组织。将ApoE cDNA序列克隆到pMD18-T载体,双酶切并连接构建ApoE真核表达载体pEGFP-C1-ApoE,利用PK15和PC12细胞对载体的功能进行了验证。结果显示,在两种细胞中都检测到绿色荧光,证明真核表达载体pEGFP-C1-ApoE在PK15和PC12细胞中均能正常表达目的蛋白。为了进一步验证重组质粒的功能,将质粒注入小鼠睾丸,自然交配获得57只F1代小鼠,PCR检测获得阳性小鼠2只,转基因阳性率为3.5%。