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目的:探讨超氧化物歧化酶(SOD)和一氧化氮(NO)在三氧化二砷(As<,2>O<,3>)抗S<<180>肉瘤细胞作用中发挥的作用,为其治疗肿瘤提供新的理论依据.方法:1体外实验①S<,180>腹水型荷瘤鼠肿瘤细胞腹腔传代,无菌抽取腹水,洗涤,淋巴细胞分离液分离后提取肿瘤细胞,分别与As<,2>O<,3>Oumol/L(阴性对照组),0.25、0.5、1.0、2.0umol/L(实验组),阿霉素(ADM)1.0ug/ml(阳性对照组)共同孵育48、72h,MTT法计算As<,2>O<,3>作用于S<,180>肉瘤细胞后肿瘤细胞生长抑制率.②共同孵育72h,取出培养板中附有肿瘤细胞的玻片固定,HE染色观察形态学改变.③共同孵育72h,离心收集细胞,生理盐水洗涤,2000rpn/min离心15min,2﹪戊二醛固定,制备电镜切片观察超微结构改变.④共同孵育72h,离心收集细胞,洗涤,粉碎,检测肿瘤细胞内SOD(总超氧化物歧化酶(TSOD)、含铜锌超氧化物歧化酶(CuZnSOD)、含锰超氧化物歧化酶(MnSOD))、细胞内活性氧(ROS)、一氧化氮合酶(NOS)(总一氧化氮合酶(TNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS))、一氧化氮(NO)及培养上清中乳酸脱氢酶(LDH)的改变.2体内实验①建立S<,180>肉瘤小鼠皮下移植瘤模型,随机分为五组,每组12只,雌雄各半.于皮下接种S<,180>肉瘤细胞96h时分别腹腔给予生理盐水(阴性对照组)、ADM2.0mg/kg.d(阳性对照组)和As<,2>O<,3>1.0 mg/kg.d、2.0mg/kg.d、3.5 mg/kg.d(实验组),每天一次,连续给药7天.停药后2天处死小鼠,完整剥离皮下肿瘤,称重并计算瘤重抑制率.②取部分肿瘤组织,固定,HE染色,观察形态学改变.③取部分肿瘤组织匀浆后检测肿瘤组织内SOD(TSOD、CuZnSOD、MnSOD)、ROS、NOS(TNOS、iNOS)、NO及LDH的改变.④应用免疫组织化学方法检测肿瘤组织中iNOS及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达.⑤解剖小鼠,取心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸骨骨髓,称重并制作HE切片观察实验浓度范围内各组As<,2>O<,3>对小鼠的毒性作用.3数据分析采用Stata8.0软件进行单因素方差分析及Scheffe法分析组间差异.iNOS,VEGF阳性表达采用Kwallis检验及秩变换检验分析组间差异,相关性分析采用spearman等级相关.检验水准为0.05.结论:1 As<,2>O<,3>对S<,180>肉瘤细胞及S<,180>肉瘤小鼠皮下移植瘤具有生长抑制作用,其生长抑制与肿瘤细胞的凋亡及坏死有关,并具有时间及剂量的依赖性.2 As<,2>O<,3>作用后,肿瘤细胞和肿瘤组织TSOD、MnSOD、CuZnSOD降低,以TSOD、MnSOD降低明显,ROS升高,TSOD和ROS呈负相关,提示As<,2>O<,3>可以通过降低肿瘤细胞TSOD,升高ROS,从而诱导肿瘤细胞凋亡,促进肿瘤细胞坏死以发挥其抗肿瘤作用.3 As<,2>O<,3>作用后,肿瘤细胞和肿瘤组织NOS、NO降低,TSOD和NO呈正相关;肿瘤组织iNOS、VEGF蛋白表达下降,iNOS和VEGF蛋白表达呈正相关.提示As<,2>O<,3>可以通过降低肿瘤细胞TSOD进一步下调NOS活性,NO生成减少,间接下调VEGF蛋白表达而阻断血管生成,从而抑制肿瘤生长.