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SR/CAMTA蛋白家族是真核生物界普遍存在的一类转录因子,在生物体生长发育调控过程中行使重要的功能。SR/CAMTAs蛋白有多个预测的功能域,且以一个相似的顺序排列。此外,他们还拥有一个新颖的序列特异性DNA结合域(CG-1),这个DNA结合域不仅能够直接与DNA结合激活转录,还可以与其他的转录因子相互作用而作为一个辅助激活子来激活转录。SR/CAMTAs基因在生物体内的功能呈现多样化,不仅能够调节生物体对外部刺激的响应、控制生长和细胞增殖,还可能在情景记忆、抑癌因子方面发挥重要功能。目前在番茄中已经分离出7个SR/CAMTAs基因成员,但他们的功能并不非常明确。本研究选取了与其他6个同源性较低的SlSR4基因作为研究对象,进行了进一步的研究工作。 采用Real-timePCR技术分析了SlSR4基因在番茄各组织的表达水平,SlSR4基因在AC++各组织中呈现广谱性的表达,其中Fl(花)中表达最高,果实时期表达水平相对较低;在突变体Nr、rin的果实中,SlSR4基因也有不同程度的表达。 采用Real-timePCR技术分析了SlSR4基因在番茄幼苗脱水、伤害、冷、盐胁迫处理下的表达水平。结果显示,SlSR4基因在脱水、伤害、冷和盐四种处理条件下均有不同程度的响应,但在盐处理下响应最明显。这表明:SlSR4基因很可能在这些非生物胁迫的信号途径中行使重要的功能。 采用Real-timePCR技术分析了SlSR4基因在番茄幼苗在GA、ABA、ACC、Meja、IAA和SA六种激素处理下的表达水平。结果表明:SlSR4基因对ABA的诱导并不敏感,对ACC和MeJA有轻微的响应,对GA、IAA和SA有较明显的响应。 我们构建了SlSR4基因的RNAi沉默载体,通过农杆菌介导的遗传转化技术获得了叶片中沉默效率较好的转基因番茄株系。采用Real-timePCR技术分析了番茄果实B+4时期几个果壁代谢相关基因的表达,结果发现,SlSR4基因沉默导致PG、PE1、CEL基因的表达上调,且降低了番茄果实的耐贮性。此外,SlSR4基因在果实中的沉默效率远低于叶片。 我们利用T1代转基因幼苗进行了盐胁迫实验,结果表明:SlSR4基因沉默影响了转基因幼苗下胚轴的生长,降低了对盐胁迫的耐受性,还抑制了胁迫相关基因的表达。 我们在转基因番茄中检测了其他6个SR/CAMTA家族基因的表达水平,结果显示:在转基因番茄B+4果实中SlSR2、SlSR2L、SlSR3和SlSR3L的表达有轻微上调,SlSR1和SlSR1L没有明显变化;转基因番茄幼苗在盐处理后,这6个基因的表达水平有不同程度的下降。表明:SlSR4基因对同家族其他基因的表达有一定的影响,且在果实和叶子中影响程度并不相同。 综上所述,本研究对SlSR4基因在番茄中的功能进行了探索和分析,对培育耐贮性和耐盐性番茄作物提供了一定的理论依据。