论文部分内容阅读
目的：白桦脂酸是从白桦树树皮中分离出来的三萜类化合物，具有多种药理活性，如抗炎活性、抗肿瘤活性和抗HIV活性。信号转导和转录激活因子3（STAT3）是一种能调节细胞生存、增殖和分化的转录因子，近年来成为肝病治疗的一种新的作用靶点。本研究通过体外实验探讨白桦脂酸是否具有抗肝纤维化作用及其潜在的分子作用机制。 方法：首先采用LPS（1μg/ml）处理RAW264.7细胞0-12小时，收集细胞上清液，0.22μM过滤后应用ELISA方法检测上清液中IL-6含量。然后采用不同浓度白桦脂酸（0-25μM）预处理t-HSC/Cl-6细胞2小时之后给予LPS处理RAW264.7细胞12 h的上清液孵育不同时间（0-6 h），药物剂量和受试时间依实验要求而定，分别提取细胞总蛋白、核蛋白和浆蛋白。应用蛋白印迹方法检测 t-HSC/Cl-6细胞中α-SMA、Collagen-1、MMP-13、TIMP-1、p-STAT3、STAT3、TLR4、CD14、p-AMPK、AMPK、p-LKB1和LKB1的表达情况。 结果：1、LPS刺激RAW264.7细胞0-12 h测得上清液中IL-6的含量随时间延长而增加，前3 h含量增长不大，6 h开始含量明显增加，12 h与前几组相比IL-6大量增加。 2、白桦脂酸降低了t-HSC/Cl-6细胞中α-SMA、Collagen-1的表达，并且表现出时间和剂量依赖性。同时，白桦脂酸增加了MMP-13的表达，降低了TIMP-1的表达，提高了MMP-13和TIMP-1的比值。另外，白桦脂酸预处理后t-HSC/Cl-6细胞中p-STAT3的表达明显升高，TLR4和CD14的表达降低，而p-AMPK的表达增加，均表现出一定的时间和剂量依赖性。 结论：白桦脂酸能够有效上调t-HSC/Cl-6细胞中p-STAT3的表达，从而调节肝纤维化进程。其作用机制可能与TLR4的抑制和p-AMPK的激活有关。