论文部分内容阅读
目的三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)是指雌激素受体(endocrine receptors,ER)、孕激素受体(progesterone receptors,PR)以及人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER2)表达均为阴性的一类异质性较高的特殊类型乳腺癌,占所有类型乳腺癌的20%左右,其具有发病年龄较低、组织学级别高、转移复发率高、预后差的特点,因缺乏内分泌治疗和抗HER2治疗的受体靶点,目前并没有针对性的治疗方案。因此寻找合适的分子靶点作为TNBC的治疗方向是改善其预后的根本方案。肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophage,TAMs)是肿瘤微环境中的重要组成部分,占所有间质细胞的80%左右。巨噬细胞有一系列独特的细胞表面标志物,分泌细胞因子调节免疫,它既存在于血管周,也存在于无血管区域,常聚集于组织的缺氧区。肿瘤组织中的TAMs表达多种肿瘤促进因子,例如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF),从而发挥其促进瘤周血管和淋巴管形成的作用,促进肿瘤的浸润转移进程。TAMs通过不同的分子通道增强肿瘤的侵袭力,这些肿瘤包括乳腺癌,胃、结直肠癌,胰腺癌,肺癌,舌鳞癌,恶性胶质瘤,前列腺癌等。但是仅有少量研究表明,TAMs在TNBC的发生发展过程中起到重要的作用。值得注意的是,TAMs发挥促肿瘤作用主要依靠其促进血管生成的功能。Semaphorin4D(SEMA4D)又称为CD100,作为SemaphorinⅣ亚族的一名重要的成员,在促进肿瘤血管生成以及肿瘤发生发展转移过程中发挥显著生物学功能。SEMA4D在多种实体肿瘤细胞上有较高的表达,其中包括头颈部鳞状细胞癌、软组织肉瘤、前列腺癌、胃癌、结肠癌、卵巢癌等。SEMA4D与其受体Plexin B1结合并在内皮细胞的表面,从而发挥促进血管形成、刺激内皮细胞的活化和迁移,促进肿瘤细胞的迁移侵袭等生物学过程作用。SEMA4D在肿瘤细胞与TAMs错综复杂的相互作用中扮演一个不可忽视的角色。有研究显示TAMs可以影响SEMA4D在肿瘤组织中的表达。目前,虽有关于TAMs和Semaphorin4D的研究,但在TNBC中两者的表达及关系尚无报道。本研究将通过免疫组织化学染色技术检测TAMs和SEMA4D在TNBC中的表达情况,分析TNBC的临床病理学特征、TAMs和SEMA4D的表达与乳腺癌临床病理学特征的关系以及TAMs和SEMA4D表达的相关性,初步阐明TNBC中TAMs与SEMA4D的表达及其相关性。方法随机选取2007年1月到2011年12月之间的110例TNBC作为实验组,同时期的106例非特殊型浸润性导管癌(IDC-NOS)作为对照组,采用免疫组织化学染色(Immunohistochemistry,IHC)技术SP法检测肿瘤细胞Semaphorin4D、VEGF的表达及TAMs(CD68)在组织学水平上的表达情况,分析TAMs和SEMA4D在两组病例中的表达情况、相关性及其与各临床病理学参数的关系。结果1.相对于非TNBC,TNBC的淋巴结转移率(P=0.001)和复发转移率(P=0.023)较高,CD68和SEMA4D蛋白的表达水平较高(P=0.015,P=0.0131),差异具有统计学意义;2.TNBC中CD68阳性表达率为72.17%,明显高于非TNBC中表达率60%,χ2=5.377,p<0.05,差异具有统计学意义。并且TNBC中的SEMA4D的阳性表达率63.48%也明显高于非TNBC中的表达率49.52%,χ2=5.838,p<0.05,差异具有统计学意义;3.TAMs的表达(CD68)与是否为TNBC具有相关性,差异具有统计学意义(P<0.05),但与其他临床病理学参数例如年龄、肿瘤大小、组织学分级、三项激素受体表达情况、淋巴结转移情况以及是否复发或转移均无显著相关性。而SEMA4D蛋白的表达则与年龄(P=0.008)、ER受体(P=0.041)、三阴与否(P=0.013)、淋巴结转移情况(P=0.049)以及是否复发或转移(P=0.012)具有相关性,且差异具有统计学意义;4.乳腺癌组织中的SEMA4D表达与肿瘤微环境中TAMs CD68的表达呈正相关(相关系数r=0.191,P=0.002),差异具有统计学意义;5.乳腺癌组织中SEMA4D的表达与血管内皮生长因子(VEGF)的表达呈正相关(相关系数r=0.357,P<0.001),差异具有统计学意义;同样的,乳腺癌肿瘤微环境中TAMs的表达与血管内皮生长因子(VEGF)也呈正相关(相关系数r=0.217,P=0.001),差异具有统计学意义;6.SEMA4D和CD68高表达均会降低TNBC患者的无病生存时间(DFS)和总生存时间(OS),但是多因素生存分析表明,只有三阴与否以及SEMA4D的表达是影响乳腺癌患者的独立预后因素。结论1.相对于非TNBC,TNBC的淋巴结转移和复发转移的可能性较大,TAMs和SEMA4D蛋白的表达较高;2.TAMs的表达仅与是否为TNBC相关,而SEMA4D蛋白的表达则与年龄、ER受体、三阴与否、淋巴结转移情况以及是否复发或转移具有相关性;3.乳腺癌组织中的SEMA4D表达与肿瘤微环境中TAMs具有相关性,TAMs可能通过某种途径促进SEMA4D的表达;4.乳腺癌组织中SEMA4D的表达以及肿瘤微环境中TAMs促进血管内皮生长因子(VEGF)的表达,从而促进瘤周血管生成影响肿瘤进程;5.SEMA4D的高表达影响TNBC患者的预后,而TAMs在本研究中并不能作为影响TNBC患者的独立预后因素。