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第一部分SKA1在骨肉瘤中的表达及其沉默后对细胞恶性增殖和周期进展的影响研究背景和目的:骨肉瘤是最常见的骨原发性恶性肿瘤,发病年龄小,侵袭性强,早期易发生远处转移。近年来,SKA1作为纺锤体与动粒相关蛋白复合体(spindle and kinetochore associated complex,SKA)的重要组成亚基,受到了越来越多研究者的重视。SKA1在细胞有丝分裂染色体的平均分配过程中发挥至关重要的作用,目前已发现SKA1在口腔鳞癌、肝细胞癌、胃癌、神经胶质瘤组织中均有较高表达,且对细胞增殖和克隆形成能力有影响,然而,SKA1在骨肉瘤中的作用还未见报道。本文旨在研究SKA1是否是调节骨肉瘤恶性增殖的一个关键分子。方法:采用Real-time PCR分别检测骨肉瘤细胞MG-63,SW1353,U2OS,SF86中SKA1m RNA的表达,Western blot检测其SKA1蛋白的表达,用Lv-sh SKA1和Lv-sh Con分别转染骨肉瘤U2OS细胞,Western blot检测转染后蛋白的表达情况,采用MTT、克隆形成实验及流式细胞术分别检测Lv-sh SKA1转染后对细胞增殖、克隆形成和细胞周期分布的影响。结果:骨肉瘤细胞MG-63,SW1353,U2OS,SF86均检测到SKA1 m RNA的表达,MG-63,U2OS,SF86均有SKA1蛋白的表达;Lv-sh SKA1转染U2OS细胞后,SKA1蛋白表达明显下调,细胞增殖能力显著减弱,克隆形成能力显著下降,并使S期和G2/M期的细胞显著减少,G0/G1期和sub-G1期细胞显著增多。结论:沉默SKA1基因可显著降低骨肉瘤细胞的恶性增殖和克隆形成能力,并影响细胞周期的调控,SKA1在骨肉瘤恶性增殖过程中发挥正调控作用,是调节骨肉瘤细胞恶性增殖的一个关键分子,有望作为骨肉瘤基因治疗的一个分子靶标。第二部分骨肉瘤肺转移患者预后相关因素的临床研究研究背景和目的:骨肉瘤是最常见的骨原发性恶性肿瘤,发病年龄小,侵袭性强,早期易发生远处转移。肺部是其发生远处转移最常见的部位,而肺转移是导致骨肉瘤患者治疗失败和死亡的最主要原因。本研究通过分析针对骨肉瘤肺转移病灶的不同治疗方法与患者预后的关系,为这类患者的临床治疗决策提供依据。方法:回顾性分析2006年1月-2011年8月期间收治且随访的87例骨肉瘤肺转移患者的临床资料,根据肺转移病灶治疗方法的不同将其分为外科手术联合全身化疗组(21例),伽玛刀联合全身化疗组(26例),单纯全身化疗组(40例)。Kaplan-Meier法对患者的生存情况进行分析,应用log-rank检验进行预后的单因素分析,应用COX回归模型进行预后的多因素分析。结果:3组患者的中位无进展生存期(progression-free survival,PFS)分别为外科手术联合全身化疗组8个月,伽玛刀联合全身化疗组6个月,单纯全身化疗组3个月,外科手术联合全身化疗组和伽玛刀联合全身化疗组中位PFS均高于单纯全身化疗组(P<0.001,P=0.009)。3组患者的3年生存率分别为38.10%、30.77%和12.50%。单因素分析显示:单肺与双肺转移、初治与复治、肺部转移灶的数目及分布类型、肺以外其他部位转移及肺部转移灶的治疗方法是影响骨肉瘤肺转移患者预后的相关因素(P<0.05);多因素分析显示:肺转移灶的治疗方法是影响患者预后的独立因素(P<0.05)。结论:外科手术联合全身化疗或伽玛刀联合全身化疗可提高骨肉瘤肺转移患者的疗效,值得进一步做大样本的临床研究。