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核桃(Juglans regia L.)具有无融合生殖能力,利用无融合胚建立核桃的离体再生体系,这在栽培和育种上均具有很重要的理论和实践意义。本论文观察了不同核桃品种(系)的无融合生殖率,研究了适宜的外植体灭菌方法和控制褐化的方法,筛选了诱导核桃胚萌发以及核桃茎段培养的培养基和培养条件。主要结果如下:1.不同核桃品种(系)的无融合生殖能力调查。采用套袋隔离,观察了5个供试核桃品种(系)的无融合生殖能力。结果表明,供试材料均具有无融合生殖能力,平均无融合生殖率为52.47%。其中,‘香玲’的无融合生殖率为54.67%,‘元林’为52.33%,‘瑞嘉’为56.67%,‘瑞秀’为49.67%,‘Y17’为49.00%,方差分析显示各品种间无融合生殖能力差异显著。2.核桃离体胚萌发成苗的最佳培养基组合是DKW+6-BA 2.0mg·L-1+PVP200mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1。最佳灭菌条件及培养基的选择。外植体材料为5个供试品种的无融合生殖胚,核桃胚在70%酒精消毒30s,0.1%升汞表面消毒5min的情况下灭菌效果最好,污染率仅为1.11%。核桃胚在MS、DKW、1/2MS、WPM等4个基本培养基中的萌发率差异显著,在DKW中的萌发率最高为73.50%。培养基中添加蔗糖浓度为30g·L-1时,核桃胚萌发率最高为72.39%,不同浓度蔗糖的基本培养基诱导核桃胚萌发的差异显著。培养基的pH值在5.8时,核桃胚的萌发率最高为73.04%,不同pH值的基本培养基诱导核桃胚萌发的差异显著。最佳取材时间的确定及不同品种(系)的萌发成苗率。取材时间在7月15号左右的核桃种胚萌发成苗率很高,为78.10%,核桃幼胚的萌发成苗率比成熟的核桃胚萌发成苗率高,不同的取材时间萌发成苗率差异显著。核桃的5个品种中,‘Y17’的萌发成苗率最高为79.29%,5个品种之间的萌发成苗率差异显著。培养条件的优化包括温度、湿度、光照强度的筛选。当培养箱温度为26℃,核桃胚萌发成苗率最高为71.35%,相对湿度为40%,核桃胚的萌发率最高为71.37%,光强3000lx时,核桃胚的萌发率最高为71.33%,且不同的温度条件之间,湿度条件之间、光照强度之间的差异性显著。PVP的浓度为200mg·L-1,核桃胚的褐化率为2.26%,不同浓度的PVP对核桃胚褐化率影响差异性显著。且转接时间隔4天时可以降低核桃胚的褐化率。植物生长调节剂的筛选。在核桃胚离体萌发的培养中,不同的植物生长调节剂对核桃胚的萌发成苗影响表现为当6-BA的浓度为2.0mg·L-1时,核桃胚的萌发成苗率最高为73.58%。当KT的浓度为1.0mg·L-1时,核桃胚的萌发成苗率最高为70.46%。当2,4-D浓度为2.0mg·L-1时,核桃胚的萌发成苗率最高为60.68%。不同浓度的6-BA、KT、2,4-D之间影响核桃胚萌发成苗差异显著,以6-BA的诱导效果最好。Picloram可以诱导核桃胚产生不定芽,且当Picloram的浓度为0.01mg·L-1时,产生的不定芽数最多,不定芽长势最好,不同浓度的Picloram对核桃胚不定芽的诱导差异性显著。不同浓度的IBA对核桃胚萌发成苗影响差异不显著,且诱导率极低。3.核桃茎段不定芽萌发分化的最佳培养基组合是DKW+6-BA1.5mg·L-1+IBA0.01mg·L-1+PVP 300mg·L-1+蔗糖30g·L-1+琼脂7g·L-1。在核桃的茎段培养中,植物生长调节剂6-BA1.5mg·L-1和IBA0.01mg·L-1的组合,KT1.0mg·L-1和IBA0.01mg·L-1的组合,核桃茎段的增殖芽数多,长势好,且前者强于后者,后者诱导茎段长出许多无效的愈伤组织。PVP的浓度为300mg·L-1时可以将核桃茎段的褐化率降低到9.79%。核桃茎段的品种不同,诱导增殖芽数也不同,5个品种中,‘Y17’增殖倍数最大为3.63。