目的：对泛素水解酶22（Ubiquitin-specific processing enzyme22，USP22）基因转录起始位点上游启动子区域进行克隆与鉴定，界定出USP22基因核心启动子的范围，为USP22基因表达调控的深入研究奠定基础。方法：运用cDNA5’末端快速扩增（5’RACE）方法对USP22基因转录起始位点的确定。以人基因组为模板，利用巢氏PCR方法对USP22基因5’端侧翼区包括转录起始点在内进行扩增，PCR产物两端分别引入KpnI和BglII酶切位点。凝胶回收扩增产物，TA克隆，DNA测序鉴定扩增片段正确无误。将PCR扩增产物定向克隆入荧光素酶表达载体PGL-3Basic，构建含USP22启动子序列和荧光素酶报告基因的重组质粒。脂质体介导以上重组质粒与内参质粒PRL-TK共同转染HepG2细胞和HeLa细胞，运用荧光素酶报告基因分析法，检测不同片段启动子转录活性，同时设立阴性对照组(PGL-3Basic)。对所得数据进行统计分析，鉴定出USP22核心启动子区域。结果：鉴定USP22只有一个转录起始点，位于翻译起始点ATG上游-176bp。克隆出8个USP22启动子片段，酶切及测序结果证实USP22启动子系列递减片段插入到荧光素酶报告基因载体PGL-3Basic中，构建USP22promoter/PGL-3Basic真核表达载体。重组质粒瞬时转染入HepG2细胞和HeLa细胞后，荧光素酶检测结果表明USP22promoter在肿瘤细胞中具有很强的转录活性，调控USP22基因表达的核心启动子片段推测是-210～-7区域，且在-595～-326之间可能有正性调控序列，在-866～-595之间可能有抑制性DNA元件。结论：确定USP22基因转录起始位点（Transcription starting sites，TSS），克隆和鉴定USP22基因的核心启动子，为进一步研究对USP22转录调控起关键作用的DNA元件的深入研究奠定基础。