随着核技术的发展和放射医学在临床诊疗中的广泛应用,辐射损伤的几率越来越多。特别是伴随着恶性肿瘤的发病率越来越高,对恶性肿瘤的放疗成为造成辐射损伤的主要来源之一。肠道属于电离辐射损伤的敏感组织,其中尤以小肠最为敏感。特别是盆腹腔肿瘤的放疗,肠道损伤严重,症状明显,产生强烈的副作用。在盆腹腔肿瘤放疗期间,约有50%-70%的患者有急性胃肠道的症状,其中尤以腹痛、腹泻最为常见,副作用严重者导致放疗不得不终止,这些病例中约有5%-10%因肠道损伤严重而危及生命。面对越来越多的辐射损伤,对辐射损伤的防护与治疗研究尤为迫切。辐射损伤具有全身效应,对全身各个系统、器官都具有不同程度的损伤,因此辐射损伤的防护和治疗仍然是世界性难题。在某种程度上来说,辐射损伤的防护意义大于治疗,未病先防、既病防变的“治未病”原则和“扶正”“祛邪”的治疗原则对于辐射损伤的防治有着重要的指导意义。中医辨证论治、中药复方在临床上针对放疗的防护与治疗有着大量、有效的临床实践,因此运用中医药理论与实践防治辐射损伤有一定的优势。目的在理论上从中医学角度阐释现代医学解剖定位的小肠功能,并探讨电离辐射致小肠急性损伤的中医学病机,为小肠急性辐射损伤的辨证论治提供理论依据;在实验研究中,首先观察电离辐射对小鼠小肠的急性损伤作用,然后探究中药复方预防给药对小鼠小肠急性辐射损伤的防护效应,最后以TLR5/NF-κB信号通路为基点探索中药复方对辐射致小鼠小肠急性损伤的防护机制。方法理论研究:通过查阅大量关于中医和现代医学对于小肠功能认识的文献,参考前人的相关研究成果,思考,总结,从中医学角度阐释现代医学解剖定位的小肠功能;同时查阅大量肠道辐射损伤的病理学、临床症状、以及有关学者对其进行的中医理论研究成果,依据中医理论的病因、诊断、病机学内容,对肠道辐射损伤这一新的病种进行中医病机探讨分析。实验研究:实验一:2.0 Gy 60Coγ射线致BALB/c小鼠小肠急性损伤作用研究雄性BALB/c小鼠按体重随机分为正常组、模型组,模型组小鼠给予2.0 Gy 60Coγ射线一次性全身照射。照射前、后随时观察小鼠整体状况,记录小鼠体重。分别于照后1天、3天脱颈椎处死,取小鼠小肠组织分别进行相关指标检测。实验二:照前给予中药复方对2.00Gy60Co γ射线致BALB/c小鼠小肠急性损伤的防护效应探究雄性BALB/c小鼠按体重随机分为正常组、阳性药组、中药复方高剂量组、中药复方低剂量组。照射前阳性药组给予阳性药安多霖水溶液预防灌胃给药10天,中药复方高、低剂量组分别给予中药复方高、低剂量水溶液预防灌胃给药10天,正常组、模型组给予去离子水灌胃对照。预防给药10天后,除正常组外,其余各组小鼠分别给予2.0 Gy60Coγ射线一次性全身照射。分别于照射前、照后1天、照后3天、照后7天脱颈椎处死,取小鼠小肠组织分别进行相关指标检测。实验三:2.0 Gy 60Coγ射线致BALB/c小鼠小肠急性损伤的中药防护机制研究实验分组,给药干预,造模同实验二。照射前、后随时观察小鼠整体状况,记录小鼠体重。分别于照射前、照后1天、照后3天、照后7天脱颈椎处死,取小鼠小肠组织分别进行相关指标的检测。结果1、理论研究表明:中医用“脾升胃降”理论基本概括了人体的消化、吸收、排泄功能。中医对肠道的消化过程有非常清楚的认识,胃之“受纳腐熟”、脾之“消”“磨”与小肠之“受盛”“化物”反映了现代医学肠道的消化功能;小肠之“泌别清浊”与脾之“运化”“升清”体现了现代医学的肠道吸收功能;通过胃之“降浊”、小肠之“泌别清浊”与大肠之“传导”“变化”,实现了现代医学肠道的排泄功能;通过“泌别清浊”、“传导、变化糟粕”、“升清”、“降浊”行使了卫气的御邪作用,发挥了肠道的屏障功能,保障机体健康;同时,从脾“藏意主思”和“思伤脾”“思则气结”可以看出中医很早就意识到“脑-肠互动”,不仅有丰富的理论,而且临床应用甚广。电离辐射致肠道急性损伤的中医病机基本概括为:邪盛伤正,气血乏源,虚实夹杂;升降失常,泌别失职,传导失司;“热”“湿”“毒”“瘀”蕴结,损伤血络;屏障缺失,易于恶化。因此在临床上对电离辐射致肠道急性损伤的中医辨证论治应切中病机,有的放矢。治则上须扶正祛邪,辨清主次。具体落实在治法上,则应健脾益气,胜湿止泻,清热解毒,凉血活血,恢复升降之气机,增强肠道之卫外功能。2、2.0 Gy 60Coγ射线一次性全身照射后导致BALB/c小鼠小肠严重损伤:(1)2.0Gy60Coγ射线照射后,小鼠饮食量减少,精神萎靡,反应迟钝,倦怠少动,静多动少,毛色粗糙,体重下降明显。表明2.0 Gy 60Coγ射线全身照射对小鼠损伤严重。(2)小鼠小肠病理切片显示小肠组织损伤明显。绒毛变短,隐窝变浅,甚至出现绒毛破损,从微观层面显示小鼠小肠损伤严重。(3)小肠组织凋亡细胞数量骤增,抑凋亡基因Bcl-2的表达被显著抑制,凋亡基因Bax表达增高。提示射线损伤与凋亡密切相关,同时对基因层面也有显著影响。3、中药复方低剂量预防给药10天能显著防护2.0 Gy 60Co γ导致的BALB/c小鼠小肠急性损伤:(1)中药复方预防给药能够显著改善小鼠肠道环境,增强肠道功能。预防给药10天可增进食欲,小鼠肠道吸收能力加强,体重增加;表现在微观上,中药复方低剂量预防给药能使小肠绒毛显著增高,隐窝加深。(2)中药复方低剂量预防给药10天能有效防护2.0 Gy 60Coγ射线导致的BALB/c小鼠小肠急性辐射损伤。能有效防止体重过快下降,保护肠道黏膜不被射线严重损害,维持小肠绒毛长度、隐窝深度,提高肠道组织occludin mRNA表达,有效降低辐射导致的凋亡细胞数量骤增。4、中药复方对2.0 Gy60Coγ射线致BALB/c小鼠小肠急性损伤的防护中TLR5/NF-κB相关通路变化:(1)中药复方预防给药对照前TLR5/NF-K B通路中TLR5、NF-κB蛋白的表达无明显作用。预防给药10天后,能显著降低凋亡基因Bax mRNA的表达,对抑凋亡基因Bcl-2mmRNA、对肠隐窝干细胞具有保护作用的IL-11 mRNA有升高趋势。(2)中药复方低剂量预防给药受辐射损伤后,TLR5、NF-κB蛋白,TLR5mRNA、MyD88 mRNA表达在照后1天、3天显著降低,TLR5/NF-K B通路下游IL-lmRNA、TNF-ααmRNA在照后1天亦有低表达趋势。照后7天,TLR5、NF-κ B蛋白,TLR5 mRNA、MyD88 mRNA表达继续维持在较低水平,说明中药预防给药在照后能够维持TLR5/NF-κ B通路的低表达。(3)中药复方低剂量预防给药受照后,抑凋亡基因Bcl-2mRNA显著升高,凋亡基因Bax mRNA显著降低,说明中药复方预防给药能够降低辐射导致的凋亡,这可能是防护作用的重要机制。结论1、中医用“脾升胃降”理论基本概括了人体的消化、吸收、排泄功能;认为人体通过“泌别清浊”、“传导、变化糟粕”、“升清”、“降浊”行使了卫气的御邪作用,发挥了肠道的屏障功能,保障人体健康;同时,从脾“藏意主思”和“思伤脾”“思则气结”可以看出中医很早就意识到“脑-肠互动”,不仅有丰富的理论,而且临床应用甚广。2、电离辐射致肠道急性损伤的中医病机基本概括为:邪盛伤正,气血乏源,虚实夹杂;升降失常,泌别失职,传导失司;“热”“湿”“毒”“瘀”蕴结,损伤血络;屏障缺失,易于恶化。因此在临床上对电离辐射致肠道急性损伤的中医辨证论治应切中病机,有的放矢。3、2.0 Gy60Coγ射线一次性全身照射后导致BALB/c小鼠小肠损伤严重,可以作为小肠急性辐射损伤的动物模型。4、中药复方低剂量预防给药10天能显著防护2.0 Gy 60Coγ导致的BALB/c小鼠小肠急性辐射损伤。5、中药复方低剂量组预防给药能够显著增强小鼠强肠道功能,改善肠道环境,增强小鼠肠道抗凋亡能力,同时,可能对肠道隐窝干细胞具有辐射防护作用,这些作用可能是防护肠道辐射损伤的重要机制;中药预防给药在照后能够维持TLR5/NF-κB通路的低表达,能够降低辐射导致的凋亡,这可能是预防给药减轻辐射损伤的重要机制之一。