博落回生物碱成分分离及抑菌活性研究

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博落回(Macleaya cordata)系罂粟科(Papaveraceae)博落回属植物,分布于我国陕西、贵州、云南等大部分省区,为我国广泛野生植物。博落回是我国传统的中草药,有很强的药理活性,入药可治跌打损伤、关节炎、风湿关节痛、下肢溃疡、阴道滴虫等;作为生物农药可防治螨虫、稻椿象、稻苞虫、钉螺、蛆虫、蚜虫等。本试验通过植物化学成分预试验方法研究了博落回植物含哪些化学成分;采用醇类溶剂提取、薄层色谱、柱色谱等技术对博落回生物碱成分进行分离纯化,得到部分生物碱化合物;并通过理化性质、波谱分析等方法对分离得到的化合物进行结构鉴定;采用纸片法对博落回提取物的体外抑菌活性进行系统研究。研究获得如下结果:1.博落回植物化学成分预试利用系统预试方法对博落回所含的化学成分进行预试验,结果表明博落回中含有生物碱、氨基酸、香豆素、糖、皂甙、挥发油、甾体;不含有机酸、酚类、鞣质、黄酮、蒽醌。2.博落回总浸膏提取、分段萃取及TLC分析采用乙醇冷浸和乙醇热回流结合超声两种方法提取博落回总浸膏,结果表明乙醇热回流结合超声提取的方法得到的浸膏较多,提取率达4.05%。两部分总浸膏分别经酸碱处理,用不同极性的溶剂萃取后,得到5部分浸膏:分别为酸性氯仿部分浸膏(W1)、碱性沉淀部分浸膏(M2)、碱性氯仿部分浸膏(W2)、乙酸乙酯部分浸膏(W3)和正丁醇部分浸膏(W4)。W1、M2、W2、W3、W4五部分浸膏的萃取率不同,分别为8.02%、7.21%、0.25%、0.20%、3.23%和10.56%、9.53%、0.37%、0.24%、6.02%。并对五部分浸膏进行了TLC分析,结果表明M2部分含生物碱成分最多,至少有10种;W1、W2和W3部分的生物碱成分也较多,分别至少为7种、7种和6种;W4部分的生物碱成分较少,至少有3种。3. W1、M2和W4三部分浸膏的生物碱成分研究W1部分经干法上样硅胶柱层析分离,氯仿:甲醇(100:1.7~100:30)的洗脱剂进行梯度洗脱,TLC检测合并得到A、B、C、D、E、F、G和H八个部分。B和C部分反复硅胶柱层析处理,得到以血根碱为主要成分的混合物;D和E部分反复硅胶柱层析处理得到以白屈菜红碱为主要成分的混合物;F部分经硅胶柱层析分离得到生物碱7-羰基-8-甲氧基-5-甲基-2,3-(亚甲二氧基)-苯并[c]菲啶;M2部分硅胶柱层析分离,洗脱剂氯仿:甲醇(400:1.7、300:1.7~300:40)进行梯度洗脱后,得到X1-1混合物和X2混合物,对两部分分别进行处理得到小檗红碱和氧化血根碱;W4部分经硅胶柱层析分离,用丙酮:甲醇:氨水(8:2:1)洗脱剂进行单梯度洗脱分离到小檗红碱。生物碱7-羰基-8-甲氧基-5-甲基-2,3-(亚甲二氧基)-苯并[c]菲啶为首次从该植物中分离得到。4.博落回各部分提取物的体外抑菌活性研究采用纸片法研究了博落回提取物对金黄色葡萄球菌,大肠埃希菌,无乳链球菌,沙门氏菌,多杀性巴氏杆菌和蜡样芽胞杆菌6种菌株的作用。本试验针对每段分离部分进行了抑菌活性试验,结果表明W1~W4五部分中,W1部分的抑菌效果最好,W3部分在100 mg/mL时仍没有抑菌效果;A~H各部分均有抑菌效果,除了沙门氏菌外,8部分物质对于其他5种菌株有较好的抑菌效果;X1~X5五部分,除沙门氏菌外,对其他各菌株都有很好的抑制作用,以血根碱和白屈菜红碱为主的混合物抑菌效果最好,小檗红碱、氧化血根碱和生物碱7-羰基-8-甲氧基-5-甲基-2,3-(亚甲二氧基)-苯并[c]菲啶的抑菌效果较差。
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