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目的:探讨姬松茸多肽的抗衰老作用及其机制。方法:硫酸铵沉淀及酶解法提取多肽,DEAE-32,Cellulose CM-52和Sephadex G-25柱层析纯化得ABp;继续利用Superdex 30柱层析纯化得到ABp-S2,分析ABp-S2中组分构成;ICR小鼠分为空白对照组(Con)、模型组(Mod)、吡拉西坦组(Pir)及姬松茸多肽组(ABp);通过避暗仪和Morris水迷宫测试小鼠的学习记忆能力;检测小鼠血清中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、过氧化氢酶活性(Catalase,CAT)和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)含量,HE和免疫双荧光染色法观察海马神经元结构变化;转录组学测序(RNA-seq)分析基因的差异表达;q RT-PCR验证显著差异基因m RNA表达量;Western blot检测脑组织中Keap1、Nrf2、HO-1、P53、Hsph1、Apoe、Trim32蛋白表达量。利用MTT法检测ABp-S2中不同多肽对衰老细胞的修复率。小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)分为Con组、Mod组、姬松茸多肽低剂量组(ABp-RQR-L)、姬松茸多肽中剂量组(ABp-RQR-M)姬松茸多肽高剂量组(ABp-RQR-H),检测细胞外液中CAT、MDA、ROS、T-AOC、炎症因子白介素-1β(interleukin-6,IL-1β)、炎症因子白介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(tumor necrosos factor,TNF-α)含量。β-半乳糖苷酶染色法观察细胞形态及阳性细胞百分率。Western-blot法检测Keap1、Nrf2、HO-1、TLR4、NF-κBp65细胞因子表达水平以及应用ML385阻断剂后Nrf2、HO-1蛋白因子的表达变化。结果:经柱层析纯化分离纯化后得单峰即为ABp,分子量(M)3kD;ABp-S2由多肽ABp-RRQ、ABp-RQR、ABp-TRAR构成;其中ABp-RQR为主要活性成分;与Mod组比较,ABp组小鼠水迷宫及避暗潜伏期缩短,错误次数减少(P<0.05);血清中CAT、T-AOC明显升高,ROS、MDA含量下降(P<0.05);HE染色结果显示ABp组神经元排列紧密,核固缩细胞数量减少;ABp组与Mod组比较,筛选出差异基因295个,基因上调有79个,下调216个;q RT-PCR验证结果显示ABp组脑组织中Hsph1、Trim32、HK1、Hn RNPA1、Grik5 m RNA表达量增高,Apoe、Atp1a3、Stxbp1、Mapk8ip1 m RNA表达量降低(P<0.05)。Western blot结果ABp组脑组织Keap1、P53蛋白表达量降低,Nrf2、HO-1、Hsph1、Trim32蛋白表达量升高(P<0.05)。与Mod组比较ABp-RQR各组中SOD、CAT活性增强,MDA及ROS含量降低,IL-1β、IL-6及TNF-α含量下降(P<0.05);β-半乳糖苷酶染色显示ABp-RQR各组与Mod组比较形态规则且阳性细胞数目减少(P<0.05);与Mod组比较ABp-RQR各组中Nrf2、HO-1、TLR4、NF-κBp65表达升高,Keap1表达降低(P<0.05)。ML385干预后ABp-RQR组Nrf2及HO-1细胞因子表达减弱(P<0.05)。结论:ABp可以改善衰老模型小鼠体内的氧化应激损伤,起到抗衰老的作用;具体机制可能通过调控相关因子Apoe、Hsph1、Trim32、Atp1a3、Stxbp1、Mapk8ip1、Hn RNPA1、Hk1、Grik5 m RNA的表达有关;ABp-RQR可以改善D-gal诱导的NIH/3T3细胞的衰老;具体机制可能通过调控Keap1/Nrf2/ARE和TLR4/NF-κBp65信号通路减轻氧化-炎症反应以产生抗衰老作用。