论文部分内容阅读
癌症是目前威胁人类健康的重大疾病之一,其发病率逐年升高,并有年轻化的趋势。传统的治疗方式如手术、放疗和化疗等,并不能彻底根治肿瘤。近来,越来越多的研究表明在多种类型的肿瘤中存在肿瘤干细胞,这些细胞在肿瘤的发生、发展、抵抗放疗和化疗以及转移与复发中起到重要的作用。有研究表明miRNAs与肿瘤的增殖,干细胞与肿瘤干细胞的分化与自我更新等生物学功能相关。其中miR-489降低了卵巢癌细胞SKOV3和OVCAR3经顺铂处理后的存活率,在小鼠中,其通过靶向DEK调控小鼠肌肉干细胞静息;此外miR-128通过靶向Bmi-1降低神经胶质瘤干细胞的增殖水平等。对miRNA在肿瘤中的调控机制的研究,对肿瘤的治疗具有重要的意义。由于miR-489在小鼠中参与了干细胞静息的调控,本研究选取miR-489作为我们的研究对象,开展了其在肿瘤细胞中的功能研究。研究发现miR-489能够在人纤维肉瘤细胞株HT1080中引发自噬,并且证实了p38a做为miR-489的靶基因,参与了这种自噬的调控过程。过表达了miR-489后,细胞内的p38a, DEK蛋白水平降低,p53的蛋白水平升高。进一步我们通过过表达p38a shRNA,DEK shRNA的病毒分别干涉人纤维肉瘤细胞HT1080细胞中的p38a和DEK,同样诱导自噬的发生,并且在干涉了p38a之后,细胞的DEK蛋白水平下降,p53蛋白水平升高。干涉了DEK之后,p53蛋白水平升高。证实了在人纤维肉瘤细胞HT1080中存在p38a, DEK, p53调控自噬的信号通路。为了进一步研究miR-489在肿瘤中的调控,我们从人胃癌细胞株MKN45中筛选得到了胃癌干细胞。在胃癌干细胞中过表达miR-489后,p38a, DEK蛋白水平降低,p53蛋白水平升高,以及诱发胃癌干细胞的自噬,并且在转染了miR-489后,与对照组相比,胃癌干细胞的成球率显著下降了,表明miR-489可能参与调控胃癌干细胞的增殖或分化。在胃癌干细胞球中我们还发现了具有荧光滞留的静息细胞,并对其自噬调控进行了分析。我们的研究为进一步揭示miR-489在肿瘤细胞中的生物学功能奠定了重要的基础。