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目的：探讨葛根素预处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用机制是否通过改变eNOS蛋白表达及其磷酸化，以及可能的信号传导通路。 方法：成年雄性SD大鼠90只，随机分为5组，每组18只，分别是假手术(Sham)组、缺血再灌注(Control)组、葛根素预处理(PUE)组、LY294002(LY)组、LY294002+葛根素(LY+PUE)组。采用开胸结扎左冠状动脉前降支(LAD)的方法复制大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，缺血45min，再灌注120min。经BL-420E生物机能实验系统分别测定缺血前、缺血45min以及再灌注60min、120min时的左心室收缩压(Left ventricular systolic pressure，LVSP)、左心室舒张末压(Left ventrieular end diastolic pressure，LVEDP)、左室内压变化最大上升和下降速率(Maximum rate of left ventricular pressure development and decay，±dp/dtmax)。再灌注结束后用1％TTC（2，3，5—氯化三苯基四氮唑）染色测定各组心肌梗死面积。采用 ELISA试剂盒测定血浆肌酸激酶(CK-MB)活力和血浆肌钙蛋白I(cTnI)浓度水平。采用Western Blot方法分别检测各组心脏缺血区与非缺血区eNOS总蛋白表达、eNOS Ser1179位点、eNOS Ser635位点、eNOS Thr497位点的磷酸化水平，Akt总蛋白表达和Akt Thr308位点、Akt Ser473位点的磷酸化水平。采用化学比色法检测心肌组织NO的含量。 结果：与Sham组比较，Control组各时间点心肌收缩及舒张功能逐渐降低，心肌梗死面积增加，血浆CK-MB、cTnI含量明显升高（P<0.05）；与Control组比较，PUE组各时间点心肌收缩及舒张功能降低程度明显减轻，心肌梗死面积明显减少，血浆 CK-MB、cTnI含量明显降低（P<0.05）。在心肌缺血区，与Sham组比较，Control组Akt Thr308、Ser473的磷酸化水平显著升高（P<0.05），而eNOS、Akt总蛋白表达及其eNOS Ser1179、Ser635、Thr497位点的磷酸化水平差异无统计学意义；与Control组比较，PUE组eNOS Ser1179、Ser635，Akt Thr308、Ser473的磷酸化水平显著升高（P<0.05）；LY+PUE组较PUE组eNOS Ser1179、Akt Thr308、Ser473磷酸化水平下降（P<0.05），而PUE组和LY+PUE组两组eNOS Ser635磷酸化水平差异无统计学意义；各组间eNOS、Akt总蛋白表达及eNOS Thr497磷酸化水平差异无统计学意义。在心肌非缺血区，LY组、LY+PUE组较其他3组eNOS Ser1179及Akt Thr308、Ser473磷酸化水平显著下降（P<0.05）；各组间eNOS、Akt总蛋白表达及eNOS Ser635、Thr497磷酸化水平差异无统计学意义。 结论：葛根素预处理对缺血再灌注大鼠心肌的保护作用机制与其增加缺血区心肌组织eNOS Ser1179、Ser635的磷酸化有关。PI3K/Akt信号通路参与了葛根素保护缺血再灌注心肌的过程，Akt被活化后，使 eNOS Ser1179位点磷酸化水平升高、eNOS活性增强。另外，葛根素预处理还可升高eNOS Ser635位点磷酸化水平，使eNOS活性增强，起到心肌保护作用，但其信号转导通路还需进一步研究。