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肺炎克雷伯菌是临床感染中常见的革兰阴性杆菌，而β-内酰胺类抗生素是目前治疗该菌引起感染的主要药物。肺炎克雷伯菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产β-内酰胺酶。近年来的研究表明，由质粒介导产生的β-内酰胺酶在耐药过程中起重要作用，并能在同种甚至不同种细菌之间迅速传播。质粒可同时携带多种耐药基因，如超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、头孢菌素酶(AmpC酶)和金属β-内酰胺酶(MBLs)编码基因等，携带这些酶的细菌常呈多重耐药趋势，这类细菌极易在医院感染中引起暴发流行，因此，准确检测β-内酰胺酶及其发生，明确多重耐药菌产生机制，是指导抗感染治疗和防止多重耐药菌播散的关键。
目的：分析肺炎克雷伯菌多重耐药表型及质粒型β-内酰胺酶基因，探讨肺炎克雷伯菌耐药机制，为制定临床抗感染的防治策略打下基础。
方法：从哈尔滨地区连续收集非重复的肺炎克雷伯菌231株，经药敏初筛和酶表型确认试验确定产β-内酰胺酶菌株；PCR方法检测分离菌株的ESBLs、AmpC酶和MBLs基因分布；质粒消除试验进行耐药基因定位；进一步用药物敏感性试验(MIC、纸片法)确定产酶菌的耐药表型，分析产酶菌基因型与耐药表型关系。
结果：临床分离肺炎克雷伯菌中，175株耐三种以上抗生素，为多重耐药菌，占分离菌的75.8％(175/231)。产ESBLs肺炎克雷伯菌检出率为52.4％(121/231)，其中bla<,TEM>、bla<,SHV>和bla<,CTX>基因的分别占49.6％、41.3％和33.8％。共检测出产AmpC酶肺炎克雷伯菌26株，占11.3％(26/231)，其中ACT型、DHA型、CIT型分别占产AmpC酶菌的50％、30.7％和19.2％，同时产DHA和ACT型菌占19.2％。产MBLs肺炎克雷伯菌27株，占分离菌株的11.7％(27/231)，全部为VIM型。产三种β-内酰胺酶菌均为多重耐药菌，其中ESBLs阳性株对一代、二代和三代头孢菌素的耐药率均在65％以上。产AmpC酶菌对头孢西丁显著耐药，耐药率为96.2％，产MBLs菌对亚胺培南耐药率高于产其它两型酶菌株，为40.7％，差异有统计学意义。质粒消除实验证实大多数产酶菌耐药基因位于质粒上。
结论：肺炎克雷伯菌临床分离株中75.8％为多重耐药菌，对临床上常用的β-内酰胺类抗生素和非β-内酰胺类抗生素耐药显著；多重耐药菌形成的主要机制为产ESBLs、AmpC酶和MBLs，其中ESBLs的分离率最高，是主要耐药机制，同时检测出一定比例的产AmpC酶菌株和产MBLs菌株。产AmpC酶菌主要由质粒介导，对头孢西丁高度耐药。产MBLs菌耐药基因也以质粒介导为主，对亚胺培南敏感性显著降低。