榆黄蘑子实体多糖的分离纯化、结构鉴定和生物活性研究

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榆黄蘑(Pleurotus citrinopileatus)、又称金顶侧耳,隶属于担子菌亚门(Basidiomycotina)、伞菌目(Agaricales)、口蘑科(Tricholomataceae)、侧耳属(Pleurotus)。榆黄蘑在中国、日本等亚洲国家十分受欢迎,因其不仅味道鲜美,同时它所含的生物活性成分具有降血脂、抗氧化、降血糖、免疫调节和抗肿瘤等功效。在本论文中,榆黄蘑子实体经95%的酒精脱脂处理后,沸水浸提,得上清液再经过乙醇分级沉淀得到粗多糖PCP30、PCP60和PCP80。对3个组分进行体外抗氧化活性研究,包括羟基自由基清除活性、超氧阴离子自由基清除活性、DPPH自由基清除活性和总还原力。PCP60的总还原力和超氧阴离子自由基清除活性最强,同时具有较好的羟基自由基和DPPH自由基清除活性,因此选择PCP60组分进行纯化。粗多糖PCP60经DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephacryl300.柱层析纯化得到一水溶性多糖PCP60W (Mw=2.74×104Da)。紫外全扫描的结果表明其不含蛋白质和核酸,红外的结果表明PCP60W是不含糖醛酸的中性多糖。PCP60W经乙酰化和甲基化的GC与GC-MS分析后,再结合NMR谱(一维:1HNMR谱、13CNMR谱和二维谱:COSY谱、TOCSY谱、NOESY谱、HMQC谱和HMBC谱)等方法对其结构进行解析。乙酰化结果表明该多糖组分主要由甘露糖、半乳糖和3(4)-O-甲基-己糖组成。甲基化后GC-MS分析得出残基分别是端基的半乳糖,6位取代的甘露糖,还有6位取代的半乳糖。一维和二维的NMR图谱进一步分析得到PCP60W组分的大致结构如下:→6)-[α-D-Galp]m-(1→6)-[α-3-O-Me-D-Galp]n-(1→
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