肿瘤是一种严重威胁人类健康的疾病。肿瘤的发生与防治研究过去是、现在是、并在将来一定时期内仍将是生命科学研究的热点。现在的治疗方法首选手术切除，配合放疗化疗，但放疗化疗有严重副作用。因此，研究肿瘤发生与发展的分子机制，探索肿瘤基因治疗的新技术、新方法，具有十分重要的意义。 靶向性导入系统在肿瘤基因治疗中有极其重要的作用。肿瘤治疗的主要困难就是靶向性问题。解决靶向性问题是肿瘤治疗的当务之急。 癌胚抗原是最早发现的肿瘤特异性抗原，并且与多种肿瘤相关。是解决肿瘤治疗的靶向性问题的理想元件。本文研究了癌胚抗原基因(Carcinoembryonic Antigen，CEA)启动子用于靶向性基因治疗的可能性。构建了真核探针载体pEGFP-Nd及由CEA启动子控制报导基因增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein，EGFP)表达的重组表达质粒pCEA-EGFP。 以重组质粒pCEA-EGFP转染细胞，在荧光显微镜下清楚的观察到EGFP在CEA阳性的人结直肠腺癌细胞LS-174T、结肠癌细胞SW480和肺腺癌细胞A549中可特异表达，而在CEA阴性的人宫颈癌细胞HeLa及喉癌细胞HEp-2中不表达。作为对照质粒的pEGFP-N1的EGFP由CMV启动子控制，在以上5种肿瘤细胞中均有表达，无选择活性。结果表明：CEA启动子可用于CEA阳性的癌细胞的靶向性基因治疗。流式细胞计数的结果与荧光显微镜观察得到的结果一致，并对CEA启动子在不同细胞中的活性进行了初步的统计和比较。结果发现，在以上三种CEA阳性的细胞中，CEA启动子的活性从SW480、LS-174T到A549逐渐减小。摘要 以bak基因作为肿瘤治疗的效应基因，构建了CEA启动子驱动bak的质粒pCEA一bak，转染HeLa细胞及SW48O细胞，发现可以特异性的诱导SW48O细胞凋亡，作为对照，由CMV启动子驱动bak的质粒PcDNA3一bak则无特异性，在两种细胞中均引起凋亡。实验结果表明，通过CEA启动子控制bak基因能靶向性诱发CEA阳性肿瘤细胞凋亡。进一步改进、完善这一方案，有望在将来用于CEA阳性肿瘤的基因治疗。 Bcllo是新发现不久的细胞因子，在细胞凋亡和抗细胞凋亡中均能发挥作用。Bcl 10特殊的性质暗示其在细胞生理中具有非常重要的功能。可能是细胞内信号通路中的关键分子。而CEA作为最常见的肿瘤抗原，其肿瘤特异J险的产生可能与某些重要的反式调控因子有关。 本室硕士生程明首次用酵母双杂交系统证明Bcllo对Ieu和lacZ基因有转录激活功能，为了深入研究这种功能，验证Bd10与CEA启动子之间的相互作用，本文构建了能表达bcllo的质粒pCMV-bcllo，将其与CEA启动子驱动报导基因EGFP表达的质粒pCEA一EGFP共转染CEA阴性的HeLa细胞，发现bcllo能激活CEA启动子，使EGFP表达。而单独转染pCMV-bcllo或pcEA一EGFP的HeLa细胞均无EGFP表达。将表达纯化的Bcllo蛋白电泳转膜后同地高辛标记的CEA启动子DNA片段进行蛋白一核酸杂交，没有发现BcllO蛋白能同CEA启动子直接结合。但将Bcllo蛋白转膜后，同HeLa细胞的核抽提物孵育，加入地高辛标记的CEA启动子探针，发现有明显的杂交印迹，这提示Bcl 10可能是通过其它DNA结合蛋白相互作用而间接同DNA相结合。结果提示Bcllo可能以某种途径激活CEA启动子。同时也为CEA启动子的调控研究提供了一个可以尝试的方向。