本文主要是基于天麻中主要成分影响灰树花多糖代谢的机理研究。首先,在灰树花发酵体系中添加天麻提取物,探索和分析中药天麻的添加对灰树花生物量和胞外多糖产量的影响。其次,采用高效液相色谱法(HPLC)测定天麻醇提取物中天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛含量,并在灰树花发酵过程中添加不同浓度梯度的天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛纯品,探明这三种成分中对灰树花胞外多糖增效贡献力最大的成分。最后,动态测定发酵期间灰树花生物量、胞外多糖及其关键酶酶活力变化,从酶活角度论述天麻中主要成分促进灰树花胞外多糖生物合成机理。主要研究结论如下:在灰树花发酵体系中分别添加不同浓度梯度的75%天麻醇提取物,分析天麻醇提取物添加浓度对灰树花菌体生长和胞外多糖产量的影响结果表明:75%天麻醇提取物添加量在3-9 g/L是均能显著促进灰树花菌体生长和提高胞外多糖产量(P<0.05),其中添加量为7 g/L时效果最佳,生物量和胞外多糖分别达最大值1.366和2.196 g/L,与空白组比较,分别增加了78.54%和142.83%。采用不同体积分数乙醇溶液分别对天麻粉进行常温静置浸提和超声浸提后,用HPLC法测定天麻醇提取物中天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛含量。常温浸提48h条件下,75%乙醇天麻醇提取物灭菌后的所测三种成分的提取效果最佳,其天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量分别为:5.4660、0.8317、1.5913(mg/g)。根据常温浸提48h条件下,灭菌后7g 75%天麻醇提取物中天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛的含量,在灰树花深层发酵体系中分别添加不同浓度的这三种成分,结果表明:适宜质量浓度的天麻素、对羟基苯甲醇和对羟基苯甲醛均能促进灰树花菌体的生长和胞外多糖的生物合成,其中对羟基苯甲醛添加量为0.15 g/L时对灰树花胞外多糖合成的促进作用效果最佳,其胞外多糖达最大值2.251 g/L,与空白组比较增加了40.53%。因此,对羟基苯甲醛是促进灰树花菌体的生长和胞外多糖的生物合成增效贡献力最大的天麻成分。比较分析0.15 g/L对羟基苯甲醛和7 g/L天麻醇提取物对灰树花胞外多糖促进作用的结果表明,对羟基苯甲醛略低于天麻醇提取物。并且在整个发酵过程中对羟基苯甲醛的生物量和胞外多糖均略低于天麻醇提取物。动态测定灰树花发酵过程中菌体生物量、胞外多糖产量、pH值、还原糖含量和对羟基苯甲醛含量变化发现,灰树花可充分利用营养物质(葡萄糖等)和天麻活性成分(对羟基苯甲醛)来促进自身生长和胞外多糖产量生物合成。在发酵培养的1-5d,菌体生长处于调整期,灰树花率先利用葡萄糖等营养物质和天麻活性成分(对羟基苯甲醛)来促进自身生长;在发酵的5-9d,菌体生长处于对数期,灰树花快速增长的同时通过多糖合成途径大量产胞外多糖;在发酵的9-13d,菌体生长处于稳定期,灰树花菌体生长达到饱和状态,基本不再产胞外多糖。在灰树花发酵体系中添加0.15 g/L对羟基苯甲醛和7 g/L天麻醇提取物,所测五种胞外多糖合关键酶均表现出高度酶活性,并且在发酵的第7d酶活力最大。除dTDP-鼠李糖合成酶系活力是对羟基苯甲醛实验组高于天麻醇提取物实验组外,其余酶活力(包括α-磷酸葡萄糖变位酶、UDP-葡萄糖焦磷酸化酶、UDP-葡萄糖脱氢酶、dTDP-葡萄糖焦磷酸化酶)均是天麻醇提取物实验组最高。对羟基苯甲醛和天麻醇提取物主要是通过提高这五种关键酶活力来促进灰树花菌体生长和胞外多糖生物合成。本研究从酶活角度论述天麻中主要成分促进灰树花胞外多糖生物合成机理,选出胞外多糖合成关键酶,可为后期从基因水平研究此作用机理奠定基础。