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增生性瘢痕(hypertrophic-scar,HS)是创伤后,尤其是深度烧伤后最常见的一种病理性愈合现象。实质是以成纤维细胞(Fibroblasts)为主的细胞增殖、活性增强,产生大量的胶原蛋白,使含Ⅰ、Ⅲ型胶原为主的细胞外基质(extracellar matrix, ECM)成分在组织中大量沉积,而难以被机体吸收或重塑的病理状态。目前所知与外伤、烧伤、手术、感染、异物、机体局部胶原代谢失调、遗传及局部免疫功能等多种因素有关。临床上常用的治疗方法:手术治疗、加压疗法、硅胶薄膜敷贴、局部激素注射治疗、冷冻治疗、激光疗法和其它药物治疗,多方法联合治疗效果较好。尽管这些治疗方法在不同程度上可以减轻症状,但是存在着一定的局限性及各种副作用,很难获得理想地治疗效果。因此寻求有效地防治增生性瘢痕的方法是创伤修复领域的重要课题。中药治疗增生性瘢痕具有来源广泛,价格低廉,长期使用毒副作用轻微等特点,但其疗效不很确切,机制仍不很清楚,有待于进一步探讨。本实验在前期研究基础上观察三七总甙(Panax notogi-noside,PNS)对体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞( hypertrophic-scar Fibroblasts HSFb)的抑制作用,为临床上防治增生性瘢痕提供实验依据。方法:取增生性瘢痕标本共10例,其中男性5例,女性5例,年龄3-35岁。体外培养人增生性瘢痕成纤维细胞120瓶,按实验设计随机分为空白组(无血清的DMEM培养基)、对照组(新配制的10%小牛血清DMEM培养基)、PNS给药组(PNS终浓度为400ug/ml的10%小牛血清DMEM培养基),每组40瓶。每组均分为12h、24h、48h及72h时像点,每个时像点分10瓶。检测指标:1.HE染色观察HSFb的细胞形态变化;2.原代培养HSFb描绘细胞生长曲线;3.利用流式细胞仪检测细胞周期的改变;4.应用MTT比色法在检测细胞增殖率的变化;5.三维培养HSFb细胞并记录胶原收缩指数;6.免疫细胞化学染色检测HSFb中TGF-β1和α-SMA的表达。结果:1.HE染色观察HSFb的形态变化:体外培养的HSFb典型长梭形,胞体较大,胞浆丰富胞突多,呈多角型,胞核大,处于核分裂期细胞多,细胞走向趋于一致。