高保真DNA聚合酶由聚合中心和酶切中心组成，聚合中心负责DNA聚合作用；而酶切中心负责发挥其3′→5′外切酶功能，对掺入的不配对碱基予以切除，以保证PCR产物的模板依赖性。由不能及时纠正或难于纠正的错配碱基引发的“关”闭DNA聚合反应，同样保证了DNA聚合反应成熟性终产物的保真度。而含有耐外切酶消化的硫代磷酸修饰的错配引物不能被3′→5′外切酶及时校正其错配碱基，导致了DNA聚合反应的非成熟性终止，从而构成了对SNP具有高度辨认能力的SNP敏感性复合分子“开／关”系统。这一机制在很大程度上满足了后基因时代对SNP分析的要求。 目的：探索高保真DNA聚合酶介导的SNP敏感性复合分子“开／关”在应用过程中的样品浓度检测范围、引物3′端硫代磷酸修饰个数和高保真酶活性三个条件，从而确定利用DNA聚合酶高保真原理检测SNP的最适条件，为SNP的检测提供新途径。 方法：以质粒pDC316为样品，通过设计3′端与模板配对或不配对的硫代磷酸修饰引物，从样品浓度、引物3′端硫代磷酸修饰个数和高保真酶活性三个方面检测SNP敏感性复合分子“开／关”的准确性，分析出最适合的实验条件。 结果：研究中发现Pfu酶的“开／关”效应在引物3′端作一个硫代磷酸修饰时，仅在样品浓度为2ng／100μl或以下时能准确“关”闭含错配碱基的PCR反应；在引物3′端作两个硫代磷酸修饰时，在实验预设的样品浓度范围100-1ng／100μl内，都能准确“关”闭含错配碱基的PCR反应；在引物3′端作三个硫代磷酸修饰时，“开／关”效应出现假阴性结果。 Pyrobest酶介导的“开／关”效应在引物3′端作一个硫代磷酸修饰时不能准确“关”闭含错配碱基的PCR反应；在引物3′端作两个和三个硫代磷酸修饰时，均在样品浓度为10ng／100μl或以下时能准确“关”闭含错配碱基的PCR反应。 Deep Vent酶介导的“开／关”效应在引物3′端作一个和两个硫代磷酸修饰时都不能准确“关”闭含错配碱基的PCR反应；在引物3′端作三个硫代磷酸修