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AIDS是一种主要由HIV-1引起的全球性疾病,安全有效的HIV-1疫苗是预防和控制AIDS流行的最佳途径。尽管经过多年努力,针对HIV-1有效的疫苗仍然没有研制成功。在过去的数十年里,只有在泰国RV144实验表明,疫苗虽然没能控制已感染病毒者的病情进程,但实验组比对照组降低了31%的HIV-1感染率,让人们看到了研制HIV-1疫苗的希望。RV144实验中的免疫策略为金丝雀痘病毒(Canary pox virus,CPV)载体疫苗初免,Gp120蛋白疫苗加强免疫。基于以上免疫策略,我们引入可以形成病毒外壳天然结构的病毒样颗粒(Virus-like particle,VLP)作为新的疫苗,联合DNA疫苗与MVA疫苗,采用DNA初免,MVA/VLP加强免疫的策略来提高疫苗的免疫水平。本文中疫苗的基因设计是基于中国流行的HIV-1 B/C重组亚型。其中,重组DNA疫苗含有HIV-1 B/C亚型的Gag/Pol/Env基因,通过正交试验筛选DNA疫苗最优培养条件,并绘制菌种生长曲线,再扩大到5L发酵罐进行菌种的发酵培养,摸索其发酵工艺路线,并根据菌种生长状况选择最佳的收取菌体的时间,收获DNA疫苗。HIV-1 B/C亚型重组MVA疫苗感染原代鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblast,CEF),即可在上清中收获VLP疫苗,我们通过反复冻融CEF和超声破碎的方法释放细胞中的MVA病毒,并通过超速离心收集病毒,生产重组MVA疫苗。作为重组MVA疫苗的副产物,重组VLP疫苗分泌到上清中,我们通过超滤和超速离心等方法来生产VLP疫苗。本文初步建立了重组HIV-1 DNA、MVA和VLP疫苗生产工艺,用于大批量生产这三种疫苗,为疫苗的工业化生产和动物免疫研究打下基础。DNA初免-MVA/VLP加强免疫的策略将在小鼠实验中进行研究。