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黄瓜（Cucumis sativus L.）是我国第一大设施蔬菜,种植面积和产量居世界首位。设施生产中黄瓜白粉病[Sphaerotheca fuliginea（Schlecht）Poll.]等危害严重,严重影响黄瓜产量、品质和收益。因此,深入开展黄瓜响应白粉病菌侵染的分子机制研究,并寻找新的抗性基因资源具有重要意义。本实验室前期研究中发现,CsTCTPs在黄瓜响应白粉病菌胁迫中扮演着负调控因子的角色,但其作用机制尚不清楚。TCTP在真核生物中普遍存在且高度保守,动物中TCTP能通过激活TOR信号途径的上游调控因子Rheb,进而对疾病发生与免疫应答等进行调节和控制。基于此,本研究利用黄瓜子叶瞬时表达技术沉默和过表达CsTCTPs,应用RT-PCR技术检测TOR信号通路的元件基因和下游调节因子的基因表达变化,初步明确CsTCTPs在调控TOR信号途径中的作用;结合TOR抑制剂,分析抑制TOR信号对黄瓜幼苗抗白粉病的影响,明确TOR信号在黄瓜防卫反应中的作用;同时,通过农杆菌介导法对黄瓜愈伤组织进行遗传转化,获得具有CsTCTPs表达抑制和过量表达的黄瓜愈伤组织,为深入探究CsTCTPs基因介导TOR信号调控黄瓜抗病性的分子机制奠定基础。主要研究结果如下:1.构建CsTCTP1/2沉默和过表达载体,瞬时转化黄瓜子叶,分别于过表达24 h或沉默7 d后接种白粉病菌,并利用实时定量PCR技术,检测黄瓜TOR信号通路元件基因CsTOR、CsLST8、CsRAPTOR及TOR下游效应因子CsS6K、CsE2Fa、CsE2Fb的表达水平变化。结果表明,沉默CsTCTP1/2时,黄瓜子叶的抗病性增强,而过表达CsTCTP1/2时,黄瓜子叶的抗病性降低;同时,沉默或过表达CsTCTP1对TOR信号通路相关基因的表达影响无明显规律,而CsTCTP2可负相关调控TOR信号元件基因（CsTOR和CsLST8）和下游调节基因（CsS6K和CsE2Fa）的基因表达变化。由此推测,CsTCTP2可能通过直接调节TOR信号,进而调控黄瓜的防卫反应;而CsTCTP1可能通过间接影响调控TOR信号。2.利用TOR抑制剂Rapamycin、AZD8055和Torin1等抑制黄瓜幼苗TOR信号,分析TOR信号对黄瓜幼苗的生长发育和抗病性的影响。结果表明,10μmol·L-1Rapamycin、5μmol·L-1 AZD8055和10μmol·L-1 Torin1均一定程度上抑制黄瓜幼苗的生长发育,但抗病性明显提高。结合抗病性鉴定与抗性生理指标分析,筛选出最适抑制剂为5μmol·L-1的AZD8055。利用5μmol?L-1 AZD8055预处理黄瓜水培幼苗7 d,之后接种白粉病菌,测定黄瓜幼苗抗性相关酶的酶活性及木质素变化。结果表明,在白粉病菌侵染下,抑制TOR信号可促进木质素的积累,提高木质素合成相关酶PAL的酶活性;同时,增强活性氧代谢相关酶SOD、POD和CAT的酶活性,减缓MDA含量上升的幅度。综上可知,TOR信号通路负调控黄瓜抗病性。3.通过遗传转化的方法在黄瓜愈伤组织中过表达和沉默CsTCTPs基因。筛选出诱导愈伤的最佳培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+NH4NO3 2.0 g·L-1+酵母提取物5.0 g·L-1,农杆菌侵染的最佳时间为20 min;其中,CsTCTP2基因成功转入黄瓜愈伤组织中,为后续进一步探究CsTCTP2介导TOR信号通路调控黄瓜抗白粉病的分子机制奠定了实验基础。