环状RNA(circular RNA,circRNA)是具有闭合结构的一类非编码RNA,广泛存在并参与到多种真核生物的生物学过程中。目前,circRNA已被证实存在于人、猴子、猪和小鼠的不同组织和细胞中,其功能涉及吸附mi RNA、参与转录调节、编码蛋白和与RNA结合蛋白互作,而关于circRNA在骨骼肌发育中的研究报道较少。本研究通过文献报道和高通量测序结果确定circ-zfp609为研究对象,鉴定和分析其环形结构、组织和细胞表达谱。利用CCK8法、RT-q PCR和Westerrn Blot技术在细胞活力、m RNA及蛋白水平上研究circ-zfp609对细胞增殖和分化的影响。采用双荧光素酶报告基因检测系统验证circ-zfp609与mi R-194-5p及下游靶基因BCLAF1之间的关系。此外,我们还对circ-zfp609可能靶向上调BCLAF1促进成肌细胞凋亡进行了预测。本研究取得的实验结果如下:(1)相关序例比对和RNase R处理结果鉴定和分析了circ-zfp609的环形结构,成环位点与生物信息学预测结果一致,测序序列与circ Base数据库上circ-zfp609的基因序列完全一致。(2)circ-zfp609在人、小鼠和牛的基因组序列中具有高度同源性。组织和细胞表达谱显示circ-zfp609在小鼠、秦川牛(胎牛和成年牛)不同组织(心脏、肝脏、肺、肾脏、胃、肠、乳腺和腿肌)及不同细胞(C2C12、HC11、4T1、MCF-7和MDA-MB-231)中广谱表达,且circ-zfp609在胎牛及成年牛腿肌中的表达量呈现出显著的差异(P<0.01),在小鼠成肌细胞系(C2C12)中表达量较高,表明circ-zfp609可能对肌肉发育调控具有一定的影响。(3)CCK8实验检测干扰circ-zfp609对C2C12、HC11、4T1、MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖的影响,结果表明干扰circ-zfp609后,促进C2C12细胞的增殖,抑制MCF-7和MDA-MB-231细胞增殖,对HC11和4T1细胞的增殖影响作用不明显。(4)将ctrl、scr siRNA,、circ-zfp609 siRNA1转染C2C12细胞,分别在m RNA及蛋白水平上验证干扰circ-zfp609对C2C12细胞增殖分化的影响。结果表明circ-zfp609抑制C2C12细胞的增殖及分化。(5)成功构建circzfp609野生型和突变型Dual-Luciferase Reporter gene载体。以双荧光素酶报告基因检测系统验证了circ-zfp609是mi R-194-5p海绵体。(6)在m RNA水平上证实circ-zfp609上调mi R-194-5p下游靶基因BCLAF1的表达量,预测circ-zfp609可能靶向BCLAF1促进成肌细胞凋亡。