复方斑蝥胶囊血清诱导人肝癌SMMC-7721细胞蛋白质组差异表达分析

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目的:复方斑蝥胶囊是根据卫生部颁布的标准生产的纯中药胶囊制剂,临床上以治疗原发性肝癌为主,疗效较好,但其作用机制却不甚明了。本研究运用中药血清药理学结合蛋白质组学相关方法,分析复方斑蝥胶囊血清诱导人肝癌SMMC-7721细胞蛋白质组的差异表达,有助于从整体水平监测药物作用下蛋白质分子的变化规律,寻找出可能介导复方斑蝥胶囊作用的生物分子、作用靶点,从分子细胞水平推测该药的可能作用机制。方法:1.制备复方斑蝥胶囊血清和对照血清并处理肝癌SMMC-7721细胞72h后收集细胞裂解提取蛋白质。2.用双向凝胶电泳(2-dimensional gel electrophoresis, 2-DE )分别分离药物处理细胞和对照细胞蛋白质,采用宽范围(pH3-10L)结合窄范围(pH4-7L)的IPG胶条进行分离,经考马斯亮蓝染色后用PDQuest软件进行图像分析。3.对差异表达蛋白斑点用胰酶进行胶内酶切,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析酶切片断,得到肽质量指纹图(PMF),使用国际互联网上Matrix Science公司提供的PMF鉴定
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