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目的本实验应用苦味酸天狼猩红特殊染色对兔扩张皮肤中Ι型、Ш型胶原纤维的含量及其比值进行研究;应用免疫组织化学方法对兔扩张皮肤中肌动蛋白的表达进行检测,以探讨反复快速扩张、快速扩张及常规扩张对扩张皮肤中胶原纤维和肌动蛋白的影响,为临床上寻找合适的扩张方式提供实验依据。材料和方法选用6月龄雄性新西兰大白兔62只,随机分为5组:反复快速组(A组)、快速扩张组(B组)、常规扩张组(C组)、植入不扩组(D组)、正常对照组(E组)。A、B、C、D组称重后全麻下在头部皮肤和颅骨之间埋植50ml肾形扩张器,术后抗感染治疗。A、B、C组术后第3天开始扩张,A组:注入生理盐水20ml,维持30min,然后抽出20ml, 3小时后重复操作,共重复三次,最后一次抽出15ml,以后每天重复以上操作,每天保留5ml,10天完成注水,扩张器内为50ml盐水维持。B组:每天注入生理盐水5ml,不抽出,10天完成注水,扩张器内为50ml盐水维持。C组:每3天注入生理盐水5ml,共注10次,28天完成注水,扩张器内为50ml盐水维持。D组不注水。注水后为维持期,分别于维持期第1、2、3、4、6周随机抽取一定数量的动物取材,收集扩张皮肤标本,放入甲醛液中固定,石蜡包埋,制成4μm组织切片。应用苦味酸天狼猩红特殊染色法检测Ι型、Ш型胶原纤维的含量及其比值;应用免疫组织化学法检测扩张皮肤中肌动蛋白的表达。实验数据以均数±标准差表示,应用SPSS 11.5统计软件,采用方差分析的方法,P<0.05具有统计学意义。结果1胶原纤维苦味酸-天狼猩红染色组织学观察D组与E组相比,在各维持期中胶原纤维无明显变化,可观察到真皮中胶原纤维排列较规律,以I型胶原纤维为主,III型胶原纤维为辅。A、B、C组与E组相比,在扩张维持早期以I型胶原纤维为主且较粗大,排列较为紊乱, III型胶原纤维相对较少。随着维持期的延长,在维持4周后, I型胶原纤维排列逐渐规律,III胶原纤维相对增加。2胶原纤维苦味酸-天狼猩红染色半定量分析结果I型胶原纤维面积比较:A、B、C三组各维持期I型胶原纤维面积均高于D组,经统计学分析P<0.05,有显著性差异。相同维持期A、B、C三组间比较: C组>A组>B组,但经统计学分析P>0.05,无显著性差异。A、B两组内胶原纤维随着维持期的延长呈增长趋势,前4周相邻时间段之间有显著性差异(P<0.05),但4周后逐渐趋于稳定,4、6周之间无显著性差异(P>0.05)。C组内胶原纤维随着维持期的延长呈增长趋势,前3周相邻时间段之间有显著性差异(P<0.05),但3周后逐渐趋于稳定,3、4周之间无显著性差异(P>0.05)。III型胶原纤维面积比较:A、B、C三组各维持期III型胶原纤维面积均高于D组,但经统计学分析,第1周时无显著性差异(P>0.05),其余各时期有显著差异(P<0.05)。相同维持期A、B、C三组间比较:C组>A组>B组,但经统计学分析P>0.05,无显著性差异。A、B两组内胶原纤维随着维持期的延长呈增长趋势,前4周相邻时间段之间有显著性差异(P<0.05) ,但4周后逐渐趋于稳定,4、6周之间无显著性差异(P>0.05)。C组内胶原纤维随着维持期的延长呈增长趋势,前3周相邻时间段之间有显著性差异(P<0.05),但3周后逐渐趋于稳定,3、4周之间无显著性差异(P>0.05)。I/III型胶原纤维比值比较:A、B、C三组各维持期I/III型胶原纤维比值均高于D组。经统计学分析,A、B两组在前3周时,与E组相比有显著性差异(P<0.05),在4周以后无显著性差异(P>0.05);而C组在前2周时有显著性差异(P<0.05),在3周以后时无显著性差异(P>0.05)。3肌动蛋白免疫组织化学染色半定量分析结果A、B、C三组各维持期肌动蛋白阳性率均高于D组,经统计学分析P<0.05,有显著性差异。相同维持期A、B、C三组间比较:B组>A组>C组,经统计学分析,前3周时,三组间均有显著性差异(P<0.05);在4周时A、C两组间已无显著性差异(P>0.05),但在4-6周时A、B两组间仍有显著性差异(P<0.05)。A、B、C三组内肌动蛋白阳性率随着维持期的延长呈下降趋势。结论1不同扩张方式对扩张皮肤中的胶原纤维和肌动蛋白是有影响的。2反复快速扩张在相同维持期所获得皮肤的质量好于快速扩张。3反复快速扩张和常规扩张相比,可缩短疗程,并能获得相同质量的皮肤。4反复快速扩张既能缩短扩张时间,又能保证皮瓣质量,是一种安全可行的扩张方法。