耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的分布特点及耐药性研究

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研究目的:对耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的分布特点及耐药性进行研究,分析药敏结果及传播方式,为临床提供有效的诊治与预防控制措施。  研究方法:对2014年1月至2015年12月间我院临床分离出来的1823株肠杆菌科细菌进行筛选,所有菌株经法国生物梅里埃公司的全自动微生物鉴定仪VITEK2 Compact检测;耐药菌株同源性分析;不同种属传播途径分析;CRE菌株外膜孔蛋白的分析及外膜孔蛋白含量的测定。  研究结果:我院1823株肠杆菌科细菌,经过改良Hodge试验筛选确证,共分离到80株耐药菌株;从标本分布来看,主要以痰液为主,其次是尿液。从科室分布来看,最多的是重症医学科,其次是神经内科。对80株CRE进行临床常用抗菌药物检测,结果显示除对阿米卡星和甲氧苄啶/磺胺甲恶唑的平均耐药率低于50%外,对其他抗菌药物的平均耐药率均在70.0%~100%。从临床分离到80株CRE中,有21株为广泛耐药(XDR),其余为非XDR。呼吸科1病室3床的11份样本,均检测培养到肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、鲍曼不动杆菌、产吲哚黄杆菌等耐药菌株。重症医学科病房7床的8份样品,对其中耐药菌株进行筛选及药敏实验,湿化瓶口、尿道口和肛拭子中均分离出肺炎克雷伯耐药菌株。同源化分析中尿道口、肛拭子以及湿化瓶口中分离的耐药肺炎克雷伯菌均为同一耐药克隆菌株。神经内科5病室的4位患者肛拭子及湿化瓶样本采集,进行提纯、分离和药敏实验,结果显示全部分离出耐药菌株(含鲍曼不动杆菌),其中有患者分离出肺炎克雷伯菌耐药菌株。神经外科病房以及工作人员中采集20个样本,经培养与鉴定,85%标本中有耐碳青霉烯类的菌株,住院患者病床把手以及被褥等均培养出肺炎克雷伯菌。鲍曼不动杆菌A1979作为供体菌以及对药物敏感的肺炎克雷伯菌K1980做为受体菌进行接合试验,在筛选过程中获得了二者的接合子,药敏试验结果显示接合子对厄他培南、亚胺培南和美罗培南均耐药。更换所有湿化瓶之后,再对实验对象进行检测,发现仍存在肺炎克雷伯菌耐药菌株,此措施未能有效的控制耐药菌株在湿化瓶中的生长与传播。对耐药菌株的电泳分析结果显示,22株耐药菌株存在OmpK35或者同源的膜孔蛋白下调,有12株为肺炎克雷伯菌;两者正常的37株耐药菌株中,有25株为肺炎克雷伯菌;10株CRE菌株存在OmpK36或者其同源的膜孔蛋白的下调,其中包括4株肺炎克雷伯菌;有56株存在两者的丢失,其中含有32株肺炎克雷伯菌;两者正常的14株耐药菌株全部为肺炎克雷伯菌。OmpK35和 OmpK36同时丢失的一共有11株,其中肺炎克雷伯菌8株,64.6%的肺炎克雷伯菌中丢失其中的一条或者两条;两者全部正常的为11株。采用t检验对耐药菌株中的OmpK35和OmpK36及其同源蛋白的含量进行统计学分析,结果显示,CRE和CSE(碳青霉烯类敏感肠杆菌科细菌)中两种蛋白含量差异具有统计学意义(P<0.05)。对全部80例患者的资料进行整理分析,76份患者的资料信息完整,4份不完整。经分析发现,耐药菌株的感染主要为院内感染(96%),敏感菌株的感染在院内、院外均有发生,比例差距不大。患者的感染部位主要为下呼吸道,其次尿道。耐药菌株主要分布在:重症医学科、神经内科、神经外科及呼吸科,敏感菌株主要分布于VIP病房、老年科、心内科。耐药菌株感染患者中男性72%,女性28%;平均年龄(52.5±20.2)岁;敏感菌株感染患者中,男性64%,女性46%,平均年龄(64.5±19.3)岁,资料显示后者平均年龄较前者高。耐药菌株感染患者在住院治疗过程中,平均住院天数为(45.3±24.6)天,其中96%的患者为院内感染,4%的患者为院外感染;住院期间患者有的更换床位,大部分患者均具有创伤性操作(如导尿、插管、机械通气等);使用过的抗生素有哌拉西林/舒巴坦、头孢吡肟、莫西沙星、头孢哌酮/舒巴坦、亚胺培南及替加环素等。在整个治疗过程中,92%的患者痊愈出院。感染患者的标本中,耐药菌株检测到50株,产KPC酶的占了大部分,在敏感菌株中,肺炎克雷伯菌株为56株。通过分析发现患者入住重症监护室引起的院内感染、碳青霉烯类抗生素的使用以及创伤性操作是产生耐药菌株的危险因素。  研究结论:  1.碳青霉烯酶耐药菌株呈上升趋势。  2.院内耐药菌大量存在,包括水平传播和克隆传播。  3.院内对耐药菌的控制需要进一步加强。
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