白芨水煎剂对蒽醌类药物所致结肠黑变病的保护作用以及机制研究

来源 :浙江中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yf_kyo
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目的 通过大黄提取液灌胃制备豚鼠结肠黑变病(melanosis coli,MC)模型,并予10%白芨水煎剂灌肠,探讨白芨水煎剂对MC的改善作用以及对结肠黏膜上皮细胞凋亡和结肠组织TNFα、Bcl-2、Bax表达的影响。方法 清洁级豚鼠40只,完全随机分为3组:正常组8只,模型组16只,白芨煎剂组16只。模型组及白芨组均予大黄提取液6g/kg·d连续灌胃60d,造模开始2周后模型组予生理盐水灌肠,白芨组予10%白芨水煎剂灌肠,每周3次。造模结束后,观察豚鼠肠壁色素沉着情况。分别应用HE染色、黑色素染色、透射电镜检测豚鼠结肠黑变病理改变以及超微结构变化;TUNEL染色检测结肠上皮细胞凋亡;Western blotting检测TNFα、Bcl-2 及 Bax 的表达。结果 1.组织学大体评分:造模后,白芨组结肠组织学大体评分显著低于模型组(p<0.05)。2.HE染色:造模后,白芨组可见结肠黏膜上皮细胞少量脱落,固有层散在分布棕黄褐色色素颗粒。3.黑色素染色:造模后,白芨组结肠粘膜黑色素染色阳性程度较模型组轻微。4.透射电子显微镜:造模后,模型组可见多数上皮细胞胞浆内大小不等空泡样改变,偶可见凋亡上皮细胞;白芨组个别线粒体轻度空泡样改变,上皮细胞凋亡不明显。5.TUNNEL染色:造模后,白芨组细胞凋亡阳性率显著低于模型组(p<0.05)。6.TNFα表达:造模后,白芨组结肠组织TNFα的蛋白表达量较模型组显著下降(p<0.05)。7.Bcl-2和Bax表达:造模后,与模型组比较,白芨组的Bcl-2的蛋白表达量显著下降(p<0.05),Bax表达显著增高(p<0.05)。结论 白芨水煎剂可以通过抑制豚鼠MC结肠组织Bcl-2的蛋白表达,增加Bax表达,降低Bcl-2/Bax的比值,抑制细胞凋亡,从而改善豚鼠MC。
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